Anticorpo Policlonar Anti-M6PR independente de cátions (IGF2R) para WB, IF/ICC, ELISA - P11717

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da M6PR independente de cátions (IGF2R)

• O receptor de manose-6-fosfato independente de cátions (CI-M6PR), também conhecido como receptor do fator de crescimento semelhante à insulina 2 (IGF2R), CD222 ou MPR300, é codificado pelo gene IGF2R em humanos. É um grande receptor transmembrana multifuncional que desempenha papéis essenciais no tráfego de enzimas lisossomais e na remoção de fatores de crescimento.
• Medeia o transporte de enzimas lisossomais fosforiladas recém-sintetizadas do complexo de Golgi para os lisossomos. Ele se liga aos resíduos de fosfomanosil nessas enzimas, e o complexo receptor-ligante é entregue a um compartimento pré-lisossômico ácido onde ocorre a dissociação. O receptor é então reciclado de volta para o Golgi por meio do complexo retromer. Referências relacionadas: PMID:18817523 PMID:2963003
• Se liga ao fator de crescimento semelhante à insulina 2 (IGF2) com alta afinidade, levando à internalização e degradação lisossomal do IGF2. Essa função regula negativamente a sinalização do IGF e limita o crescimento fetal. A perda de imprinting ou mutações no IGF2R estão associadas a câncer e distúrbios do desenvolvimento. Referências relacionadas: PMID:18046459
• Atua como regulador positivo da coativação de células T ao se ligar à dipeptidil peptidase 4 (DPP4/CD26) na superfície celular, conectando as funções metabólicas e imunológicas. Referências relacionadas: PMID:10900005
• Localiza-se principalmente na membrana do aparelho de Golgi e na membrana do endossomo, onde circula entre a rede trans-Golgi, os endossomos e a membrana plasmática para capturar carga intracelular e na superfície celular.
• Sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação, palmitoilção e metilação. Contém pontes dissulfeto, é fortemente glicosilado e está ancorado às membranas por meio de uma única hélice transmembrana. Essas características são essenciais para sua estabilidade, tráfego e funções de ligação ao ligante.
• A proteína madura tem um peso molecular aparente de aproximadamente 274 kDa, consistente com a massa prevista a partir de sua sequência de aminoácidos. Seu grande domínio extracelular é composto por 15 unidades repetidas, que estão envolvidas na ligação de manose-6-fosfato e IGF2.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado foi uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 2327–2491, localizada na região C-terminal do receptor. Esse desenho pode favorecer o reconhecimento da CI-M6PR (IGF2R) de comprimento total em sua conformação nativa.
• Dado o alto peso molecular (~274 kDa), considere o uso de géis de SDS-PAGE de baixa porcentagem (por exemplo, gel de resolução de 6%) e tempos de transferência estendidos ou métodos de transferência úmida para garantir o blotting eficiente da proteína alvo.
• Este anticorpo é policlonal de coelho; pode detectar bandas adicionais devido ao reconhecimento de múltiplos epitopos. Valide a especificidade comparando as intensidades de sinal entre lisados de controle e de silenciamento/remoção do IGF2R.
• Para imunofluorescência, confira que o padrão de coloração se sobrepõe aos marcadores estabelecidos de Golgi/endossomo. As condições de permeabilização devem ser otimizadas, pois o epitopo é intracelular.
• Em aplicações de ELISA, use o imunógeno recombinante como controle positivo para avaliar a atividade de ligação. Não extrapole os limites de detecção quantitativa apenas pelas especificações do produto; a titração empírica é recomendada.

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