Anticorpo monoclonal de coelho Anti-CBFB para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13951

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CBFB

• Codificado pelo gene CBFB, a subunidade beta do fator de ligação ao núcleo é uma subunidade de fator de transcrição que forma um complexo heterodimérico com proteínas da família RUNX (RUNX1, RUNX2, RUNX3), conhecido como fator de ligação ao núcleo (CBF). O CBFB aumenta alostericamente a afinidade de ligação ao DNA dos fatores de transcrição RUNX.
• Os complexos CBF se ligam à sequência consenso principal 5′-TGTGGT-3′ em amplificadores e promotores de vários genes, incluindo o vírus da leucemia murina, o amplificador do polyomavírus, os amplificadores do receptor de células T, LCK, IL3 e GM-CSF, regulando assim a transcrição.
• Durante o desenvolvimento de células T citotóxicas (CD8+), os complexos CBF atuam como silenciadores transcricionais ao se ligar à sequência de ligação RUNX dentro do lócus ZBTB7B, reprimindo sua expressão para permitir a diferenciação.
• O CBFB é alvo da proteína Vif do HIV-1, que o recruta para formar um complexo de ubiquitina-proteína ligase E3 Cullin-5-RING (complexo ECS) que catalisa a ubiquitinação e degradação de APOBEC3F e APOBEC3G (PubMed:22190037, PubMed:31792451, PubMed:36598981). O complexo também pode ubiquitinar a APOBEC3H em certa medida (PubMed:37640699). A associação com a Vif também inibe a atividade de coativador do CBFB (PubMed:22190037). Referências relacionadas: PMID:22190037 PMID:31792451 PMID:36598981 PMID:37640699
• A localização subcelular é predominantemente nuclear, consistente com seu papel na regulação transcricional.
• Palavras-chave do UniProt destacam seu envolvimento no splicing alternativo, rearranjos cromossômicos (por exemplo, inv(16) na leucemia mieloide aguda), potencial proto-oncogênico e associações a doenças, incluindo nanismo. Também é uma fosfoproteína.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que cobre os aminoácidos 1-182 do CBFB humano. Essa porção N-terminal contém o domínio conservado necessário para a interação com o RUNX e é idêntica ou altamente semelhante em camundongos e ratos, o que sustenta a reatividade cruzada observada.
• Para western blot (WB), é esperada uma banda próxima a 22 kDa. Considere usar extratos nucleares e controles de carga apropriados.
• A imunofluorescência (IF/ICC) e a imuno-histoquímica (IHC-P) devem revelar a localização nuclear. Valide em linhagens celulares ou tecidos conhecidos por expressar CBFB.
• O ELISA pode ser usado para análise quantitativa; as condições de revestimento e as concentrações do anticorpo ideais devem ser determinadas empiricamente.
• Como com qualquer anticorpo, valide no contexto experimental específico e considere controles de pré-adsorção, se necessário.

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