Anticorpo Policlonal Anti-CCT4 para WB, IF/ICC, ELISA - P50991

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CCT4

• A CCT4 codifica a subunidade delta do complexo de anel da proteína 1 do complexo T (TCP-1) (TRiC), uma chaperonina citosólica que medeia o dobramento dependente de ATP de ~10% do proteoma, mais notavelmente actina e tubulina. Referências relacionadas: PMID:25467444, PMID:36493755, PMID:35449234
• O TRiC também dobra a proteína 1 do corpo de Cajal da telomerase (WRAP53/TCAB1), ligando a função da CCT4 à manutenção dos telômeros. Referências relacionadas: PMID:25467444
• A chaperonina contribui para a ciliogênese ao auxiliar a montagem do BBSome, um complexo crítico para o tráfego de vesículas para os cílios. Referências relacionadas: PMID:20080638
• A CCT4 localiza-se predominantemente no citoplasma e concentra-se nos centrossomos e nos corpos basais dos cílios, consistente com o seu papel no dobramento de proteínas do citoesqueleto e transporte ciliar.
• A proteína está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação e fosforilação, que podem regular a atividade da chaperonina.
• O splicing alternativo produz múltiplas variantes de transcritos, sugerindo diversificação funcional.
• Como uma subunidade do TRiC, a CCT4 faz parte de um grande complexo hetero-oligomérico composto por oito subunidades diferentes dispostas em uma estrutura de anel duplo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 130-390 da CCT4 humana; espera-se que a ligação a epítopos dentro desta região seja específica, mas a reatividade cruzada com outras subunidades TCP-1 deve ser descartada devido à homologia de sequência em toda a família.
• Para Western blot, sugere-se uma diluição inicial de 1:1000 para lisados de humano, camundongo e rato; espera-se uma banda próxima a 58 kDa. Inclua controles positivos e negativos relevantes.
• Em imunofluorescência, a CCT4 demonstra coloração citoplasmática com enriquecimento nos centrossomos e corpos basais ciliares; a pré-extração com detergente pode aumentar o sinal dos microtúbulos e dos corpos basais.
• Para aplicações de ELISA, utilize a proteína recombinante ou lisados celulares como antígeno de revestimento; a variabilidade entre lotes inerente aos anticorpos policlonais deve ser avaliada para consistência quantitativa.
• Dada a reatividade do anticorpo em humanos, camundongos e ratos, ele é adequado para estudos translacionais nessas espécies.

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