Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CD117 para WB, ELISA - P05532

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD117

• O CD117, também conhecido como c-Kit ou receptor do fator de crescimento de mastócitos/células-tronco Kit, é uma tirosina quinase de receptor codificada pelo proto-oncogene Kit (SWISS: P05532). Pertence à família de receptores de tirosina quinase tipo III, caracterizada por domínios imunoglobulina-like extracelulares e um domínio quinase intracelular.
• Ao se ligar ao seu ligante KITLG/SCF, o CD117 dimeriza e autofosforila, desencadeando vias de sinalização a jusante, incluindo PI3K-AKT, RAS-MAPK/ERK e JAK-STAT. Essas cascatas regulam a sobrevivência celular, proliferação, hematopoiese, manutenção de células-tronco, gametogênese, melanogênese e desenvolvimento de mastócitos.
• Existem múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo. A isoforma 1 e a isoforma 2 são encontradas na medula óssea e espermatogônias; a isoforma 3 é enriquecida em células-tronco hematopoiéticas e detectada em estágios posteriores da espermatogênese.
• Subcelularmente, o CD117 localiza-se principalmente na membrana celular, mas também pode ser internalizado e detectado no citoplasma após ativação ou durante a renovação do receptor.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de pontes dissulfeto, ubiquitinação e extensa fosforilação em resíduos de tirosina. Essas modificações modulam a atividade do receptor, estabilidade e saída de sinalização.
• O CD117 é amplamente expresso em células-tronco hematopoiéticas, mastócitos, melanócitos, células germinativas e células intersticiais de Cajal. Mutações ou expressão aberrante estão associadas a várias patologias, incluindo mastocitose, tumores estromais gastrointestinais e leucases.
• Palavras-chave associadas ao CD117: Splicing alternativo, Ligação de ATP, Membrana celular, Citoplasma, Variante de doença, Ponte dissulfeto, Glicoproteína, Domínio de imunoglobulina, Quinase, Magnésio, Membrana, Ligação de metal, Ligação de nucleotídeo, Fosfoproteína, Proto-oncogene, Receptor, Proteoma de referência, Repetição, Sinal, Transferase, Transmembrana, Hélice transmembrana, Tirosina-proteína quinase, Conjugação Ubl.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal foi gerado usando um imunógeno recombinante que abrange os aminoácidos 25–523 do CD117 de camundongo, correspondente ao domínio extracelular. É provável que reconheça formas nativas e desnaturadas do receptor.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto do CD117 é de aproximadamente 109 kDa. Devido à glicosilação, a banda observada pode aparecer ligeiramente mais alta ou como uma banda difusa. Execute marcadores de proteína adequados e valide a banda específica usando controles apropriados.
• Em aplicações de ELISA, considere formatos indiretos ou sanduíche. A natureza policlonal pode fornecer alta sensibilidade, mas confirme a especificidade testando em lisados negativos para CD117 ou amostras knockout, se disponíveis.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com o CD117 de camundongo. Para estudos em amostras humanas ou outras espécies, verifique a homologia da sequência e realize experimentos piloto para avaliar a reatividade cruzada.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência lote a lote pode variar. É aconselhável qualificar cada novo lote em seu sistema de ensaio específico e otimizar as diluições de trabalho.

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