Anticorpo Monoclonal Anti-CD13/ANPEP para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P15144

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Aminopeptidase N

• A aminopeptidase N (ANPEP, CD13) é uma metaloprotease dependente de zinco de ampla especificidade que desempenha um papel fundamental na digestão final de peptídeos na borda em escova do intestino e rim, processando também vários hormônios peptídicos (por exemplo, angiotensina III e IV), neuropeptídeos e quimiocinas.
• A enzima está envolvida na apresentação de antígenos ao clivar peptídeos ligados a moléculas de MHC de classe II em células apresentadoras de antígenos e também pode regular o transporte de aminoácidos interagindo com o transportador SLC6A19.
• A ANPEP funciona como um receptor para o coronavírus humano 229E (HCoV-229E) e medeia a infecção pelo citomegalovírus humano (HCMV), destacando seu papel nas interações hospedeiro-vírus.
• A nível subcelular, é uma proteína de membrana do tipo II de passagem única localizada na membrana celular; uma forma solúvel também é detectada no plasma e está elevada em pacientes com cancro.
• A expressão tecidual é ampla, incluindo rim, intestino, epitélio respiratório, células mieloides, células endoteliais, membranas sinápticas do SNC e vasos angiogênicos; é encontrada em vários tipos de tumores e metástases em linfonodos.
• As modificações pós-traducionais incluem extensa N-glicosilação, formação de pontes dissulfeto e sulfatação, contribuindo para o seu peso molecular maduro de aproximadamente 110 kDa.
• Palavras-chave adicionais: angiogênese, cristalização do colesterol, âncora de sinal, hélice transmembrana e receptor celular hospedeiro para entrada viral.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético do domínio extracelular central (aa 350-450), uma região que provavelmente é bem apresentada e conservada entre humanos, camundongos e ratos; considere isso para estudos de reatividade cruzada.
• Para o Western blot, espere uma banda específica em torno de 110 kDa; valide usando controles positivos como lisados de rim ou intestino humanos e, para camundongo/rato, use extratos de tecido de rim ou pulmão.
• Na imuno-histoquímica (parafina), deve-se observar coloração de membrana; considere a recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato, pH 6,0) e teste diluições de anticorpo começando em 1:50–1:200 em secções de rim normal ou tumor.
• Para imunofluorescência (parafina), otimize a fixação e a permeabilização; é esperado um padrão membranoso puntiforme.
• Aplicações de ELISA podem ser desenvolvidas para detecção de CD13 solúvel; avalie o emparelhamento com um anticorpo de detecção em formato sanduíche e use proteína recombinante ou plasma de paciente para curvas padrão.

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