Anticorpo monoclonal anti-CD142 (Fator Tecidual) para IF/ICC, FC - P13726

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do fator tecidual

• O CD142, também conhecido como fator tecidual (TF), fator III da coagulação ou tromboplastina, é uma glicoproteína transmembranar que atua como o principal iniciador da cascata extrínseca da coagulação sanguínea.
• Após uma lesão vascular, o TF forma um complexo de alta afinidade com o fator VII circulante (FVII) ou com sua forma ativa VIIa, e o complexo TF:VIIa ativa proteoliticamente os fatores IX e X, levando à geração de trombina e à formação do coágulo de fibrina.
• O TF desempenha um papel essencial na hemostasia normal ao organizar a cascata de proteases da coagulação nas superfícies celulares, desencadeando a formação local de coágulos em resposta a danos teciduais.
• O gene F3 humano codifica uma proteína de 295 aminoácidos, sendo que a proteína madura possui um peso molecular de aproximadamente 33 kDa; o splicing alternativo pode gerar isoformas adicionais.
• Subcelularmente, o TF está predominantemente localizado na membrana plasmática como uma proteína transmembranar de passagem única do tipo I, mas uma forma solúvel e secretada também pode ser gerada por splicing alternativo.
• O TF é altamente expresso em tecidos com uma barreira hemostática protetora, particularmente nos pulmões, na placenta e no pâncreas, em concordância com seu papel na prevenção de hemorragias.
• As modificações pós-traducionais incluem a formação de pontes dissulfeto no domínio extracelular, a palmitoilação da cauda citoplasmática e a glicosilação ligada a N, importantes para a função e a estabilidade adequadas.
• Como um fator essencial da coagulação, o TF é categorizado por palavras-chave como coagulação sanguínea, hemostasia, glicoproteína, lipoproteína e proteína transmembranar.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para imunofluorescência (IF/ICC), considere condições adequadas de fixação e permeabilização, pois o TF é uma proteína transmembranar; pode-se testar a fixação com metanol ou paraformaldeído.
• Na citometria de fluxo (FC), titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo celular e inclua controles isotípicos apropriados.
• Como o imunógeno abrange o domínio extracelular (aa 34-251), espera-se que o anticorpo reconheça a conformação nativa do TF na superfície celular, favorecendo aplicações de marcação em células vivas.
• Valide o anticorpo no seu sistema de amostra específico, pois os níveis de expressão de CD142 variam entre os tecidos; pulmão, placenta ou monócitos ativados podem servir como controles positivos.

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