Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-CD146/MCAM para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P43121

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD146/MCAM

• A proteína CD146/MCAM, também conhecida como glicoproteína de superfície celular MUC18, molécula de adesão de células de melanoma, antígeno associado ao endotélio S-endo 1 e MUC18, é um membro da superfamília das imunoglobulinas envolvida na adesão celular.
• Ela desempenha um papel crítico na manutenção da coesão da monocamada endotelial nas junções intercelulares do tecido vascular, contribuindo para a integridade vascular.
• CD146/MCAM está implicada na progressão tumoral, especialmente no melanoma, onde sua expressão facilita as interações entre as células de melanoma e o sistema vascular, potencializando a metástase hematogênica.
• Este receptor desencadeia eventos de sinalização intracelular, incluindo a fosforilação de tirosina de FYN e PTK2/FAK1, e um aumento transitório na concentração de cálcio intracelular.
• A proteína está localizada na membrana plasmática e é caracterizada por domínios semelhantes a imunoglobulinas, ligações dissulfeto e extensa glicosilação N-ligada, que são essenciais para suas funções adesivas.
• A expressão tecidual é predominantemente em células endoteliais em todo o sistema vascular, e também é encontrada em células da crista neural durante a migração embrionária. Em tecidos adultos normais, a expressão é restrita principalmente ao músculo liso vascular, mas é altamente expressa em lesões de melanoma avançadas primárias e metastáticas.
• Como indicado pelas palavras-chave do UniProt, CD146/MCAM sofre splicing alternativo e modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, que podem regular sua atividade e interações.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 26-350 da proteína humana CD146/MCAM (NP_006491.2), abrangendo a região extracelular; os usuários podem levar isso em consideração ao avaliar a acessibilidade do epítopo em diferentes aplicações.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de ~72 kDa, mas devido à glicosilação, a banda observada pode aparecer em um peso molecular maior; é aconselhável verificar o padrão de banda específico no sistema de amostra relevante.
• Ao realizar imunohistoquímica (IHC-P) ou imunofluorescência (IF/ICC), métodos apropriados de fixação e recuperação de antígenos devem ser otimizados, especialmente porque o antígeno é uma proteína de membrana.
• A reatividade cruzada com amostras de camundongo e rato é relatada, mas os pesquisadores devem validar o desempenho em seus sistemas de modelo específicos, pois a conservação do epítopo pode variar.
• Ensaios baseados em placas como o ELISA podem ser desenvolvidos com este anticorpo policlonico, mas recomenda-se a titulação e controles de especificidade para garantir um sinal robusto.

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