Anticorpo Policlonal Anti-CD152/CTLA-4 para WB, IHC-P, ELISA - P16410

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CTLA-4

• A CTLA-4 (proteína 4 do linfócito T citotóxico, também conhecida como CD152) é um recetor inibitório transmembranar e um membro da superfamília das imunoglobulinas. Existe como um homodímero ligado por pontes dissulfureto, com splicing alternativo gerando uma isoforma solúvel que carece do domínio transmembranar.
• A CTLA-4 funciona como um importante regulador negativo das respostas das células T, atuando como um recetor engodo. Compete com o co-recetor estimulatório CD28 pela ligação aos ligandos da família B7, CD80 e CD86, com uma afinidade consideravelmente superior, atenuando assim a ativação das células T. Referências relacionadas: PMID:11279501 PMID:11279502 PMID:16551244
• A proteína está localizada na membrana celular e é predominantemente expressa em tecidos linfoides, com níveis mais elevados em células T ativadas. A expressão na superfície de células T ativadas é 30 a 50 vezes inferior à do CD28.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e fosforilação, que modulam a sua dinâmica na superfície celular e a sua atividade de sinalização. O domínio extracelular contém um único domínio semelhante a IgV com uma ponte dissulfureto conservada.
• A CTLA-4 está implicada em doenças autoimunes como a diabetes mellitus tipo 1 e o lúpus eritematoso sistémico (LES), e variantes genéticas estão associadas à suscetibilidade a estas doenças.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 36-161) da CTLA-4 humana, tornando este anticorpo adequado para detetar o recetor nativo ligado à membrana. Ao planear experiências, considere a utilização de lisados de células T ativadas ou tecidos com expressão conhecida de CTLA-4 como controlos positivos.
• Para Western blotting (WB), pode observar-se uma banda correspondente a aproximadamente 25 kDa (forma monomérica) sob condições redutoras; note que a forma homodimérica de ~50 kDa também pode ser visível sob condições não redutoras.
• Em imuno-histoquímica (IHC), a recuperação de antigénio com tampão de citrato (pH 6,0) e a permeabilização podem melhorar a deteção. Foi reportado que o anticorpo apresenta reatividade cruzada com a CTLA-4 de ratinho e rato; no entanto, as diluições de trabalho ideais devem ser determinadas empiricamente.
• Para aplicações de ELISA, considere emparelhar com um anticorpo de deteção adequado que reconheça um epítopo não sobreposto e valide na matriz da amostra relevante.

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