Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD16 para WB, ELISA - P08637 / O75015

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD16 (FcγRIIIA)

• O CD16, codificado pelo gene FCGR3A (receptor de região Fc de imunoglobulina gama de baixa afinidade III-A), é uma glicoproteína transmembrana também conhecida como CD16a, FcγRIIIα, FcR-10 e receptor de Fc de IgG III-2.
• Como um receptor chave para o fragmento Fc da IgG, o CD16 reconhece complexos imunes de antígeno-IgG agrupados e desencadeia a citotoxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC) em células natural killer (NK) e monócitos. Esta função é essencial para a eliminação de células alvo revestidas por anticorpos durante a infecção e a vigilância tumoral. Referências relacionadas: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Além da atividade citotóxica, a sinalização do CD16 promove a geração de células NK adaptativas do tipo memória que produzem altos níveis de IFNG e exibem capacidades antivirais e antitumorais aprimoradas. Referências relacionadas: PMID:24412922, PMID:25786175
• O engajamento do CD16 leva à fosforilação de adaptadores contendo ITAM e ativação de quinases a jusante (por exemplo, PI3K), bem como ao fluxo de cálcio intracelular, governando tanto a produção de citocinas quanto a desgranulação. Referências relacionadas: PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• O receptor localiza-se principalmente na membrana celular das células NK e de um subconjunto de monócitos circulantes; também pode ser liberado como uma forma solúvel.
• O CD16 é altamente relevante na imunoterapia do câncer, pois medeia os efeitos antitumorais de anticorpos terapêuticos e responde com opsonização aprimorada e ADCC a glicoformas de IgG afucosiladas. Referências relacionadas: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• No contexto da infecção pelo vírus da Dengue, o CD16 pode contribuir para o aumento dependente de anticorpo (ADE), onde complexos de IgG subneutralizantes facilitam a entrada viral em células mieloides, exacerbando a patogênese.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (proteína recombinante que abrange os aminoácidos 20–208 do CD16 humano) corresponde à região extracelular; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça o CD16 nativo expresso na superfície. Os pesquisadores podem considerar o uso de coloração de células vivas ou condições não desnaturantes para preservar a conformação nativa.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto do CD16 é de aproximadamente 29 kDa (P08637) ou 26 kDa (O75015), mas a forma glicosilada madura frequentemente migra para um peso maior. Valide o padrão de bandas observado no sistema de amostra relevante e inclua controles apropriados de desglicosilação, se necessário.
• Em ELISA, este anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção. Dada a sua reatividade cruzada com o CD16 de camundongo, ele pode ser empregado em sistemas de modelos xenogênicos, mas os usuários devem confirmar a especificidade e a sensibilidade em suas próprias condições experimentais.
• Como o CD16 é expresso predominantemente em células NK e em um subconjunto de monócitos, lisados de células NK enriquecidas (por exemplo, células selecionadas como CD56-positivas) ou linhagens de células monocíticas (por exemplo, THP‑1) são controles positivos adequados. Para análise em nível de tecido, considere que a expressão de CD16 é relativamente restrita e pode exigir métodos de detecção sensíveis.

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