Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD16 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08637/O75015

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD16

• CD16a (FCGR3A) é um receptor de baixa afinidade para o fragmento Fc da IgG, expresso principalmente em células natural killer (NK) e em um subconjunto de monócitos. Desempenha um papel central na citotoxicidade celular dependente de anticorpos (ADCC) e na produção de citocinas. Referências relacionadas: PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369, PMID:27670158
• Ao se ligar a alvos opsonizados com IgG, o CD16a desencadeia cascatas de sinalização mediadas por ITAM, levando à ativação das células NK, à desgranulação e à lise das células-alvo. Esse processo é fundamental para a imunidade antiviral e a vigilância tumoral. Referências relacionadas: PMID:24412922, PMID:25786175, PMID:29967280, PMID:9916693, PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• O CD16a também pode atuar como coestimulador das células NK e mediar a lise das células-alvo independentemente da ligação à IgG, destacando seu papel na ativação da imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:10318937, PMID:23006327
• O receptor medeia a eficácia antitumoral de anticorpos monoclonais terapêuticos, com atividade aumentada observada após a ligação a IgGs afucosiladas. Referências relacionadas: PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• No contexto da infecção pelo vírus da dengue, o CD16a facilita o aumento dependente de anticorpos (ADE) ao se ligar a complexos de IgG1 afucosilada e vírus, promovendo a entrada viral nas células mieloides.
• Subcelularmente, o CD16a está ancorado à membrana celular por meio de uma hélice transmembrana e também pode ser encontrado na forma secretada. Ele sofre fosforilação e glicosilação, que modulam suas funções de sinalização.
• A expressão tecidual é restrita às células NK e a um subconjunto de monócitos, conforme confirmado em nível proteico. Referências relacionadas: PMID:2526846, PMID:27670158

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aminoácidos 20-208) do CD16b humano, sugerindo que o anticorpo reconhece um epítopo conservado entre CD16a e CD16b. Considere validar diretamente a reatividade cruzada em seu sistema experimental.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima de 29 kDa (forma não glicosilada), mas podem aparecer arrastamentos de maior peso molecular devido à glicosilação intensa. O uso de um agente redutor e a otimização da porcentagem do gel podem melhorar a resolução.
• Na IHC-P, antecipe padrões de coloração de membrana; inclua controles negativos e positivos apropriados (por exemplo, tecidos ricos em células NK, como baço ou amígdala).
• Para IF/ICC, as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para preservar o epítopo extracelular; a coloração de células vivas também pode ser adequada para o CD16 de superfície.
• As aplicações de ELISA podem se beneficiar do uso combinado com um anticorpo de detecção direcionado a um epítopo distinto; considere a possibilidade de interferência da ligação de IgG afucosilada em determinados formatos de ensaio.

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