Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD163 para WB, IF-P, ELISA - Q86VB7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD163 (M130)

• O CD163 (também conhecido como Receptor de Eliminação rico em cisteína tipo 1 proteína M130, M130, MM130, SCARI1) é um receptor regulado na fase aguda, envolvido principalmente na eliminação de complexos hemoglobina/haptoglobina por macrófagos, protegendo os tecidos de danos oxidativos.
• Liga-se a complexos hemoglobina/haptoglobina de uma forma dependente de cálcio e pH, desencadeando endocitose e subsequente degradação do heme para reciclagem de ferro, enquanto também induz cascatas de sinalização intracelular que promovem a secreção de citocinas (ex., IL6, CSF1).
• A isoforma 3 (a isoforma predominante no sangue) exibe maior capacidade endocítica e expressão superficial em comparação com outras isoformas.
• A forma solúvel (sCD163), gerada por clivagem, funciona como um mediador anti-inflamatório e serve como um parâmetro de diagnóstico para monitorizar a ativação de macrófagos em condições inflamatórias.
• O CD163 está localizado tanto na membrana celular de monócitos e macrófagos teciduais maduros (ex., células de Kupffer, macrófagos da polpa vermelha do baço) como numa forma secretada.
• Contém um péptido sinal, múltiplos domínios ricos em cisteína de recetores de eliminação (SRCR), uma região transmembranar, e está sujeito a modificações pós-traducionais incluindo glicosilação, fosforilação e formação de pontes dissulfeto.
• Expresso em altos níveis nas células de Kupffer do fígado, macrófagos da polpa vermelha do baço, macrófagos corticais do timo, macrófagos residentes na medula óssea e macrófagos meníngeos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), note o peso molecular previsto de ~125 kDa; ajuste a percentagem de gel e o tempo de transferência em conformidade para garantir uma transferência eficiente de proteínas de alto peso molecular.
• Na imunofluorescência em secções de parafina (IF-P), as condições de recuperação antigénica podem afetar a acessibilidade do epítopo; otimize a recuperação de epítopo induzida por calor (HIER) ou métodos enzimáticos para o seu tipo de tecido.
• O imunogénio é um péptido sintético que abrange o domínio citoplasmático (aa 861–961), o que pode funcionar bem na deteção de proteína total; no entanto, para ELISA sanduíche, teste a compatibilidade de emparelhamento com anticorpos direcionados a epítopos distintos.
• Como a reatividade cruzada é restrita ao humano, valide a especificidade do ensaio utilizando linhas celulares humanas apropriadas ou amostras de tecido, e considere controlos de isotipo para experiências multiplex.

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