Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CD171/L1CAM para WB, IF/ICC, ELISA - P32004

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CD171/L1CAM

• A molécula de adesão celular neural L1 (L1CAM, também designada CD171) é uma molécula de adesão celular da superfamília das imunoglobulinas que existe em múltiplas isoformas via splicing alternativo.
• Ela media a dinâmica da adesão celular e gera sinais transmembrana em receptores tirosina quinase, desempenhando papéis essenciais no desenvolvimento e função do sistema nervoso.
• Durante o desenvolvimento cerebral, a L1CAM é crítica para a migração neuronal, crescimento e fasciculação axonal e sinaptogênese; no cérebro adulto, contribui para a plasticidade sináptica e dinâmica estrutural.
• A L1CAM localiza-se na membrana plasmática e é enriquecida em projeções neuronais especializadas, incluindo cones de crescimento, axônios e dendritos.
• A proteína é uma glicofosfoproteína com domínios semelhantes a imunoglobulinas e ligações dissulfeto, e sua fosforilação regula as funções adesivas e de sinalização.
• Mutações na L1CAM estão associadas a um espectro de distúrbios neurológicos, incluindo hidrocefalia ligada ao X, síndrome MASA, paraplegia espástica tipo 1 e agenesia do corpo caloso.
• É predominantemente expressa no sistema nervoso e tem sido implicada na migração e diferenciação celular além dos contextos neuronais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Desenho do imunógeno: O imunógeno tem como alvo a região C-terminal intracelular (aminoácidos 1143-1257) da L1CAM, conservada entre humano, camundongo e rato, suportando a reatividade cruzada observada. Esta região não é esperada ser glicosilada, portanto o anticorpo pode reconhecer tanto as formas glicosiladas quanto as não glicosiladas.
• Western blotting: O peso molecular previsto é de 140 kDa, mas a extensa glicosilação tipicamente desloca a banda aparente para ~200-220 kDa. Use condições redutoras e desnaturantes e valide com lisados de cérebro ou células neuronais.
• Imunofluorescência/ICC: A permeabilização é necessária para detectar o epítopo intracelular. Sugere-se fixação com PFA a 4% e permeabilização com Triton X-100 a 0,1%. Faça co-marcação com marcadores neuronais para confirmar a especificidade em neurônios e projeções.
• ELISA: O anticorpo pode ser usado como reagente de detecção em formatos de ELISA direto ou indireto. Para ELISA sanduíche, emparelhe com um anticorpo de captura direcionado a um epítopo distinto. Titulação e otimização são essenciais.

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