Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD177 para FC, ELISA - Q8N6Q3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD177

• O CD177, também conhecido como aloantígeno 2a de neutrófilos humanos (HNA-2a), glicoproteína NB1 (NB1 GP) e proteína 1 da policitemia vera rubra (PRV-1), é uma glicoproteína ancorada por GPI expressa principalmente em neutrófilos.
• Em complexo com as beta-2 integrinas (ITGAM/CD11b e ITGB2/CD18), o CD177 media a ativação de neutrófilos primada por TNF, incluindo degranulação e produção de superóxido. Referências relacionadas: PMID:21193407
• O CD177 modula o tráfego de neutrófilos ao impedir a internalização da beta-2 integrina e atenuar a sinalização de quimiocinas, favorecendo assim a adesão em detrimento da migração. Referências relacionadas: PMID:28807980
• Através da interação heterofílica com PECAM1 nas células endoteliais, o CD177 contribui para a migração transendotelial de neutrófilos in vitro, embora estudos in vivo sugiram que ele não é essencial para o recrutamento induzido por infecção bacteriana. Referências relacionadas: PMID:17580308 PMID:23461681
• O CD177 atua como receptor de membrana para a protease maturada PRTN3, permitindo sua exibição na superfície do neutrófilo e potencialmente aumentando a integridade juncional endotelial durante a diapedese. Referências relacionadas: PMID:17244676 PMID:18462208 PMID:23202369
• Subcelularmente, o CD177 localiza-se na membrana celular, nas membranas de gotas lipídicas, nas membranas de grânulos citoplasmáticos e nos lamellipodia; também pode existir em forma secretada.
• A expressão tecidual é altamente específica da linhagem de neutrófilos, começando no estágio de metamielócito, e é encontrada em uma subpopulação de neutrófilos maduros com porcentagem variável entre indivíduos; está superexpresso em granulócitos de pacientes com policitemia vera e trombocitemia essencial. Referências relacionadas: PMID:10753836 PMID:17244676 PMID:18462208 PMID:24926686 PMID:12377969 PMID:12675722 PMID:17580308 PMID:21193407 PMID:27227454 PMID:28240246 PMID:28807980

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 22–407 do CD177 humano (NP_065139.2), cobrindo quase todo o domínio extracelular; portanto, o anticorpo é provavelmente adequado para detectar CD177 nativo de superfície celular por citometria de fluxo (FC) e ELISA.
• Para aplicações de citometria de fluxo, considere usar uma população enriquecida em neutrófilos ou amostras de sangue total de doadores saudáveis, observando que a expressão de CD177 é restrita a um subconjunto de neutrófilos maduros e pode variar entre indivíduos.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; recomenda-se a otimização empírica das concentrações de trabalho e das condições de tampão.
• Dado seu papel na ativação de neutrófilos primada por TNF, o anticorpo pode ser empregado para investigar a expressão e função do CD177 em contextos inflamatórios, mas a validação no sistema de amostra relevante é essencial.
• Como a proteína existe em múltiplas isoformas (pesos moleculares previstos de ~46 kDa para a forma completa, com possíveis formas de 27 kDa e 15 kDa), confirme os tamanhos das bandas detectadas na sua configuração experimental.

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