Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD18 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P05107

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD18

• O CD18 (integrina beta-2, ITGB2) é uma glicoproteína transmembrana tipo I que se associa a múltiplas subunidades α (CD11a, CD11b, CD11c, CD11d) para formar integrinas heterodiméricas: LFA-1 (αLβ2), Mac-1 (αMβ2), p150,95 (αXβ2) e αDβ2 (αDβ2).
• Essas integrinas medeiam a adesão e transmigração de leucócitos ao se ligarem a ICAMs (1-3), VCAM1, complemento iC3b, fibrinogênio e fator X, sendo cruciais para o tráfego e funções efetoras de células imunes (PubMed:1676048, PubMed:23775590, PubMed:38195629, PubMed:29100055, PubMed:10438935, PubMed:8777714, PubMed:9841932, PubMed:11812992, PubMed:28807980, PubMed:18587400). Referências relacionadas: PMID:1676048, PMID:23775590, PMID:38195629, PMID:29100055, PMID:10438935, PMID:8777714, PMID:9841932, PMID:11812992, PMID:28807980, PMID:18587400
• Como um receptor chave para a depuração de células apoptóticas, o LFA-1 (αLβ2) coopera com a ICAM3 para promover a fagocitose de neutrófilos apoptóticos por macrófagos (PubMed:23775590). Além disso, o αXβ2 reconhece a ICAM4 eritrocitária e a ICAM5 neuronal, ligando as integrinas à eritrofagocitose e às interações neurônio-leucócito (PubMed:16985175, PubMed:10741396). Referências relacionadas: PMID:23775590, PMID:16985175, PMID:10741396
• As integrinas CD18 contribuem para a citotoxicidade de células natural killer (PubMed:15356110). O Mac-1 (αMβ2) é necessário para a ativação mediada por CD177‑PRTN3 de neutrófilos pré-ativados com TNF (PubMed:21193407). Referências relacionadas: PMID:15356110, PMID:21193407
• Subcelularmente, o CD18 localiza-se na membrana celular e em microdomínios de membrana (rafts) de leucócitos, particularmente neutrófilos (PubMed:23775590, PubMed:21193407, PubMed:28807980). Referências relacionadas: PMID:23775590, PMID:21193407, PMID:28807980
• A proteína é altamente glicosilada, contém domínios semelhantes a EGF e possui motivos de ligação a cálcio/magnésio essenciais para a ativação da integrina. É modificada pós-traducionalmente por fosforilação e apresenta um ácido pirrolidona carboxílico em sua extremidade N‑terminal.
• Consistente com seu papel essencial na adesão leucocitária, mutações no ITGB2 estão associadas a imunodeficiências como a deficiência de adesão leucocitária (LAD) tipo I.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao N‑terminal (aa 1–100) do CD18 humano; verifique a reatividade na espécie/aplicação pretendida usando lisados de controle positivo (por exemplo, leucócitos humanos, de camundongo ou rato).
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda predominante em ~85 kDa; considere o uso de condições redutoras e sondagem com anticorpos secundários apropriados.
• Para imunofluorescência (IF‑P) e imuno-histoquímica (IHC‑P) em parafina, otimize a recuperação antigênica (a recuperação de epítopo induzida por calor é comumente necessária) e titue o anticorpo primário para reduzir o fundo.
• Aplicações de ELISA podem exigir revestimento com o imunógeno recombinante ou complexos de integrina nativa; combine com um anticorpo secundário de detecção para estabelecer uma curva padrão.
• Devido à reatividade cruzada com camundongo e rato, valide a especificidade do anticorpo nos sistemas de modelo relevantes ao alternar entre espécies.

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