Anticorpo Monoclonal Anti-CD27 para WB, IF-P, ELISA - P26842

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD27

• CD27 é um receptor coestimulador de ponto de controle imunológico pertencente à superfamília dos receptores do fator de necrose tumoral (TNFRSF7), expresso na superfície de células T, células NK e células B. Referências relacionadas: PMID:28011863
• Ao se ligar ao seu ligante CD70, CD27 ativa o eixo de sinalização TRAF2-PTPN6 que inibe a fosforilação de LCK, promovendo a formação de memória de células T e adaptação transcripcional. Referências relacionadas: PMID:38354704
• A via CD70-CD27 é essencial para a ativação e expansão de células T específicas de antígeno, o que garante a vigilância imunológica das células B. Referências relacionadas: PMID:28011863
• CD27 fornece sinalização de retroalimentação negativa durante a diferenciação de leucócitos, modulando a hematopoiese na ativação imunológica.
• No tecido adiposo, CD27 regula negativamente a função dos linfócitos Th2, influenciando potencialmente a inflamação metabólica.
• Subcelularmente, CD27 se localiza na membrana celular como uma proteína transmembrana de tipo I de passagem única.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo N-glicosilação e fosforilação, e contém três pontes dissulfeto intramoleculares que estabilizam seu domínio extracelular.
• O UniProt anota CD27 com palavras-chave como receptor, peptídeo sinal, hélice transmembrana, ponte dissulfeto, glicoproteína, fosfoproteína, apoptose e variante de doença; ele é encontrado predominantemente na maioria dos linfócitos T.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 1–100 do CD27 humano, direcionado ao domínio extracelular N-terminal, que está exposto na superfície celular e envolvido na ligação ao ligante. Este design provavelmente gera anticorpos que reconhecem o CD27 nativo expresso na superfície.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto do CD27 é de aproximadamente 29 kDa; no entanto, devido à glicosilação, ele pode migrar como uma banda difusa entre 30–55 kDa. Valide usando um lisado de controle positivo, como Jurkat ou outras linhas de células T.
• Este anticorpo foi testado para WB, IF-P e ELISA com espécies humana e de rato. Para imunofluorescência (IF-P), a permeabilização é necessária para detectar epítopos intracelulares ou verificar a coloração de superfície. Sempre inclua controles negativos apropriados.
• CD27 pode ser desprendido da superfície celular após a ativação, gerando CD27 solúvel (sCD27). Se for detectar sCD27 por ELISA ou outros métodos, considere usar sobrenadantes de cultura de células ou amostras de soro.
• Para garantir o desempenho ideal, armazene o anticorpo a -20°C em alíquotas de trabalho para evitar ciclos repetidos de congelamento e descongelamento. O transporte em bolsas de gelo indica que o anticorpo é estável sob condições de transporte frio.

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