Anticorpo Policlonais Anti-CD31/PECAM1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q08481

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD31/PECAM1

• PECAM1 (CD31) é uma glicoproteína de 130 kDa pertencente à superfamília das imunoglobulinas, atuando como uma das principais moléculas de adesão celular em células endoteliais, plaquetas e subconjuntos de leucócitos.
• Ela media interações homofílicas (PECAM1-PECAM1) e heterofílicas (por exemplo, com CD177), sendo criticamente necessária para a migração transendotelial de leucócitos em condições inflamatórias.
• A fosforilação do Tyr-679 na cauda citoplasmática regula o tráfego para o compartimento de reciclagem da borda lateral, essencial para a migração direcionada de leucócitos através das junções endoteliais.
• A ligação homofílica fornece um sinal de desprendimento que impede a fagocitose de leucócitos viáveis, enquanto liga leucócitos apoptóticos para facilitar sua eliminação.
• PECAM1 modula a ativação do receptor de bradicinina BDKRB2 e a sinalização ERK1/2 induzida por choque osmótico em células endoteliais, ligando a adesão às vias intracelulares.
• Ela contribui para a suscetibilidade à aterosclerose, como demonstrado em modelos de camundongo. Referências relacionadas: PMID:19048083
• Localiza-se em membranas celulares, lipid rafts e junções celulares, o que é consistente com seus papéis na adesão e sinalização.
• As modificações pós-traducionais incluem pontes dissulfeto, glicosilação, palmitoilação e fosforilação; o splicing alternativo gera isoformas com propriedades funcionais distintas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio C-terminal intracelular (aa 630–738); portanto, o anticorpo detecta PECAM1 de membrana de comprimento total e pode não reconhecer isoformas solúveis que não possuem a cauda citoplasmática. Valide a especificidade com controles negativos apropriados.
• Para western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 81 kDa, mas a glicosilação N-ligada extensiva pode causar migração em 120–130 kDa. Use lisados de células endoteliais (por exemplo, HUVEC, bEnd.3) ou extratos de plaquetas como controles positivos.
• Em imunofluorescência (IF-P) e imuno-histoquímica (IHC-P), PECAM1 exibe coloração membranosa e juncional. Para IHC-P, a recuperação de antígeno pode ser necessária; teste tampão de citrato ou EDTA e compare com controles de isótipo.
• Para aplicações em ELISA, considere revestir o domínio extracelular recombinante de PECAM1 ou lisados celulares, e otimize empiricamente a diluição do anticorpo e as condições de detecção.

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