Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CD34 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P28906

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD34

• O CD34 é um antígeno de células progenitoras hematopoiéticas que funciona como uma possível molécula de adesão. Ele medeia a ligação das células-tronco à matriz extracelular da medula óssea ou diretamente às células estromais, facilitando a hematopoiese inicial.
• Atua como uma estrutura de suporte para glicanos específicos de linhagem, permitindo que as células-tronco se liguem a lectinas presentes nas células estromais ou em outros componentes da medula. Também apresenta ligantes de carboidratos às selectinas.
• Está localizado na membrana, em conformidade com seu papel na adesão e na sinalização celular.
• É expresso seletivamente em células progenitoras hematopoiéticas e no endotélio de pequenos vasos de vários tecidos, destacando sua especificidade.
• A proteína é uma glicoproteína com um peptídeo-sinal e uma única hélice transmembrana, e sofre splicing alternativo e fosforilação.
• As palavras-chave incluem Adesão celular, Glicoproteína, Membrana e Fosfoproteína, ressaltando suas características estruturais e funcionais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 32-290 do CD34 humano, cobrindo uma grande porção do domínio extracelular. Espera-se que este anticorpo policlonal reconheça múltiplos epítopos nessa região, tornando-o robusto para a detecção de CD34 desnaturado ou nativo.
• Para Western blotting (WB), é esperada uma banda em torno de 41 kDa. Devem ser utilizadas condições redutoras e controles de carregamento adequados, além de otimizar o bloqueio da membrana para minimizar o sinal de fundo.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), pode ser necessária a recuperação antigênica para expor os epítopos. Recomenda-se incluir cortes de tecido conhecidos por expressar CD34, como medula óssea ou células endoteliais, para validação.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), é necessária a permeabilização para acessar epítopos intracelulares, embora o domínio extracelular possa ser detectado sem permeabilização em células vivas não fixadas.
• No ELISA, o peptídeo imunizante ou a proteína recombinante pode servir como controle positivo para confirmar a reatividade do anticorpo.

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