Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CD40L para WB e ELISA - P29965

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD40L

• O CD40L atua como um ligante de citocina crucial para o CD40 (TNFRSF5) nas células apresentadoras de antígenos, sendo essencial para a imunidade humoral dependente de células T (PubMed:1280226, PubMed:31331973). Referências relacionadas: PMID:1280226 PMID:31331973
• Ele fornece sinais coestimuladores às células T, promovendo a proliferação e a produção de citocinas como IL-4 e IL-10 após a ligação do TCR/CD3 e a coestimulação do CD28 (PubMed:8617933). Referências relacionadas: PMID:8617933
• A ligação cruzada do CD40L desencadeia a via do NF-kappa-B e a ativação das cinases MAPK8 e PAK2, além de induzir a fosforilação da tirosina da isoforma 3 do CD28 nas células T (PubMed:15067037). Referências relacionadas: PMID:15067037
• Ele medeia a proliferação de células B, a mudança de classe das imunoglobulinas e a produção de IgE na presença de IL-4, destacando seu papel na ativação das células B.
• O CD40L também é um ligante de integrina para ITGA5:ITGB1 e ITGAV:ITGB3, atuando em conjunto com o CD40 para regular resultados de sinalização, como a ativação de células B e respostas antiapoptóticas.
• A proteína está localizada na membrana celular e na superfície celular, podendo ser clivada para produzir uma forma secretada; ela é expressa especificamente em linfócitos T CD4+ ativados.
• Com uma massa molecular calculada de aproximadamente 29,3 kDa, a glicosilação aumenta o tamanho observado para cerca de 33–39 kDa em sua forma ativa de comprimento total.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 113–261, abrangendo o domínio de homologia do TNF extracelular, que é essencial para a ligação ao receptor; esse desenho pode conferir reatividade às formas ligadas à membrana e solúveis do CD40L.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto do CD40L não glicosilado é de aproximadamente 29 kDa, mas as formas glicosiladas podem aparecer em torno de 33–39 kDa; verifique a especificidade da banda usando lisados de células T ativadas ou controles de proteína recombinante.
• Para aplicações de ELISA, considere utilizar o anticorpo como reagente de captura ou detecção, em combinação com um par de anticorpos validados e compatíveis para CD40L, e otimize o revestimento utilizando proteína CD40L recombinante ou ensaios baseados em células.
• Foi relatada reatividade cruzada com o CD40L humano e de camundongo; valide o anticorpo na espécie e no sistema de ensaio selecionados antes do uso.

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