Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD44 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16070

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CD44

• O CD44 é um receptor de superfície celular que se liga ao hialuronano e a outros componentes da matriz extracelular, mediando a adesão celular, a migração e a percepção do microambiente (PubMed:16541107, PubMed:19703720, PubMed:22726066). Referências relacionadas: PMID:16541107 PMID:19703720 PMID:22726066
• Desempenha funções críticas nas atividades das células imunes, incluindo a ativação, a recirculação e o homing de linfócitos T, bem como na hematopoiese e na inflamação (PubMed:7528188). Referências relacionadas: PMID:7528188
• Por meio de seu domínio citoplasmático, o CD44 monta complexos de sinalização com tirosina-quinases receptoras e proteases de membrana, ativando efetores como PKN2, RAC1 e RHOA para regular a reorganização do citoesqueleto mediada pela actina e a migração celular (PubMed:18757307, PubMed:23589287, PubMed:15123640). Referências relacionadas: PMID:18757307 PMID:23589287 PMID:15123640
• A isoforma 10 (isoforma epitelial) é predominantemente expressa em células epiteliais e apresenta forte aumento de expressão em muitos carcinomas, enquanto sua expressão é reprimida em células de neuroblastoma.
• O CD44 localiza-se na membrana celular e nas microvilosidades, sendo também encontrado em uma forma secretada.
• Como uma proteína intensamente modificada pós-traducionalmente, o CD44 existe como proteoglicano e fosfoproteína, com múltiplas pontes dissulfeto e sítios de glicosilação.
• (Infecção microbiana) O CD44 também promove a internalização do vírus da febre aftosa por macropinocitose.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os resíduos 20–178 no domínio extracelular N-terminal; espera-se que os epítopos estejam acessíveis no CD44 nativo e desnaturado, sendo adequado para aplicações como WB, IHC-P, IF/ICC e ELISA.
• Na transferência Western, o peso molecular previsto é de aproximadamente 80 kDa, mas a glicosilação extensa e o splicing alternativo podem produzir bandas adicionais; valide com controles positivos apropriados e condições redutoras/não redutoras otimizadas.
• Na IHC-P, otimize a recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato pH 6,0) e as etapas de bloqueio; considere o uso de um sistema de detecção com polímero-HRP para maior sensibilidade.
• Para IF/ICC, é necessária permeabilização se o epítopo for intracelular; confirme a especificidade do anticorpo com controles de knockout ou knockdown.
• A reatividade cruzada com outras espécies não foi testada; se utilizado em amostras não humanas, recomenda-se fortemente a validação experimental.

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