Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD45 para IF/ICC, IHC-P, FC, ELISA - P06800

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CD45

• O CD45, também conhecido como antígeno leucocitário comum (L-CA), Ly-5 ou T200, é uma proteína tirosina-fosfatase do tipo receptor C codificada pelo gene Ptprc em camundongos. É uma glicoproteína transmembranar com peso molecular de aproximadamente 145 kDa.
• O CD45 é essencial para a ativação das células T por meio do receptor de antígeno. Atua como regulador positivo da coativação das células T após a ligação à DPP4.
• A região intracelular contém dois domínios tandem de proteína tirosina-fosfatase (PTP). O primeiro domínio possui atividade catalítica, enquanto o segundo modula a especificidade pelo substrato.
• Após a ativação das células T, o CD45 recruta e desfosforila moléculas de sinalização, como SKAP1 e FYN, além de desfosforilar a LYN para modular sua atividade.
• O CD45 interage com a CLEC10A no local de contato entre células apresentadoras de antígeno e células T. Essa interação, que envolve o CD45 portador do antígeno Tn nas células T efetoras e a CLEC10A nas células dendríticas imaturas, ajuda a ajustar os limiares de ativação das células T para prevenir a autorreatividade.
• A proteína está localizada na membrana celular, em jangadas de membrana e em sinapses imunológicas, de acordo com seu papel na sinalização proximal. As modificações pós-traducionais incluem splicing alternativo e fosforilação.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 26–566 do CD45 de camundongo (a região extracelular), sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo extracelular. Isso o torna adequado para marcação de células vivas e citometria de fluxo sem permeabilização.
• Para imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), considere otimizar as condições de fixação (por exemplo, PFA a 4%) e, se necessário, utilizar uma permeabilização suave para garantir o acesso do anticorpo, preservando a integridade do epítopo.
• Ao realizar citometria de fluxo (FC), titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo específico de célula de camundongo e inclua controles de isotipo apropriados.
• Este anticorpo foi validado para uso com amostras de camundongo. Não foi relatada reatividade cruzada com outras espécies; verifique em seu sistema, se necessário.

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