Anticorpo policlonal de coelho Anti-CD45 para WB, IP, IF/ICC, ELISA - P08575

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CD45

• A CD45 (tirosina-proteína fosfatase C do tipo receptor), também conhecida como antígeno comum de leucócitos (L-CA), LY5, B220 e T200, é codificada pelo gene PTPRC. Várias isoformas surgem do splicing alternativo.
• É um regulador positivo crítico da ativação de células T através do receptor de antígeno. O primeiro domínio fosfatase tem atividade catalítica, enquanto o segundo modula a especificidade do substrato. Referências relacionadas: PMID:35767951
• A CD45 desfosforila moléculas de sinalização chave: após a ativação de células T, recruta e desfosforila SKAP1 e FYN, e modula a atividade de LYN. A interação com CLEC10A na interface célula dendrítica-célula T modula o limiar de ativação para limitar a autoreatividade.
• Atua como receptor para a proteína do citomegalovírus humano UL11, mediando a ligação às células T e prejudicando a sinalização e a proliferação do TCR.
• Subcelularmente, a CD45 se localiza na membrana celular, nas membranas de lipid rafts e na sinapse imunológica. Ela é extensivamente glicosilada e fosforilada.
• Expressão de isoformas específica de tecido: as isoformas 1, 2, 3, 5 e 7 são detectadas nos timócitos, enquanto as isoformas 4, 6 e 8 não são.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), é esperada uma banda de ~147 kDa; valide o anticorpo em lisados de leucócitos apropriados de humano, camundongo ou rato.
• Na imunoprecipitação (IP), é possível obter o enriquecimento de CD45; experimentos de co-imunoprecipitação podem exigir otimização das condições de lise e lavagem.
• Para imunofluorescência (IF/ICC e IF-P), os protocolos de fixação e permeabilização devem ser otimizados; a coloração de superfície da CD45 pode ser realizada sem permeabilização.
• O imunógeno (aa 611–730) fica dentro da região extracelular, o que sugere potencial adequação para coloração de superfície de células vivas, embora a validação seja recomendada.
• A reatividade cruzada relatada com camundongo e rato torna este anticorpo um candidato para estudos multi-específicos; sempre verifique a especificidade no sistema de amostra relevante.

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