Anticorpo Monoclonal Anti-CD50 (ICAM-3) para FC - P32942

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD50 (ICAM-3)

• O CD50, também conhecido como ICAM-3 ou CDw50, é um membro da família das moléculas de adesão intercelular (ICAM) e funciona como um ligando para a integrina LFA-1 (ITGAL/ITGB2), mediando a adesão de leucócitos e facilitando a fagocitose de neutrófilos apoptóticos por macrófagos. Referências relacionadas: PMID:1448173 PMID:1448174 PMID:23775590
• Atua como um ligando para a integrina ITGAD/ITGB2, contribuindo para as interações célula-célula dentro do sistema imunitário. Referências relacionadas: PMID:8777714
• O CD50 liga-se ao CD209 em células dendríticas através de um mecanismo dependente de Ca²⁺ e independente de integrinas, estabelecendo o contacto inicial entre células dendríticas e células T em repouso e promovendo a proliferação de células T. Referências relacionadas: PMID:10721994
• A proteína é expressa constitutivamente apenas em leucócitos em repouso e está ausente em células endoteliais em repouso ou ativadas por citocinas. Referências relacionadas: PMID:8325327 PMID:1448174
• A nível subcelular, o CD50 localiza-se na membrana celular e é uma proteína de membrana do tipo I de passagem única.
• Pertence à superfamília das imunoglobulinas e contém múltiplos domínios do tipo Ig, ligações dissulfeto e locais de glicosilação, e está sujeito a fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio foi desenhado contra o domínio extracelular (aminoácidos 30–114), pelo que se espera que este anticorpo reconheça a conformação nativa da superfície do CD50 em células vivas. Considere o uso de controlos de isótipo apropriados e corantes de viabilidade em citometria de fluxo para fazer a seleção (gate) de células vivas e únicas.
• Titule o anticorpo para determinar a concentração de coloração ideal para o seu tipo de célula e condições experimentais específicas. Uma faixa inicial de 0,5–5 µg por milhão de células é típica para anticorpos conjugados.
• Uma vez que o CD50 é expresso em todos os leucócitos em repouso, valide o anticorpo em populações celulares conhecidas positivas e negativas (por exemplo, linfócitos do sangue periférico vs. células endoteliais).
• Para coloração intracelular, é necessário um passo de fixação/permeabilização; no entanto, note que este anticorpo visa um epítopo extracelular e pode ter melhor desempenho na coloração de superfície de células não fixadas.

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