Anticorpo Policlonal Anti-CD59 para WB, ELISA - P13987

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CD59

• A glicoproteína CD59 (também conhecida como protectina, HRF20, MACIF, MIRL, MAC-IP) é um inibidor da superfície celular do complexo de ataque à membrana (MAC) do complemento.
• Ela inibe potentemente a montagem do MAC ao ligar-se aos componentes C8 (C8A e C8B) e impedir a incorporação do C9 no poro em formação, protegendo assim as células humanas da lise mediada pelo complemento. Referências relacionadas: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Uma forma solúvel de CD59, encontrada na urina, mantém a ligação ao complemento, mas exibe uma atividade inibitória do MAC muito reduzida nas membranas celulares.
• A CD59 é ancorada à membrana plasmática através de uma ligação glicosilfosfatidilinositol (GPI) e também é detectável como uma proteína secretada.
• A proteína sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação ligada a N, formação de pontes dissulfeto e glicação, que contribuem para sua estabilidade estrutural e função.
• A deficiência genética de CD59 está associada à anemia hemolítica hereditária, ressaltando seu papel crítico na proteção das hemácias contra o ataque do complemento.
• O gene CD59 sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas variantes de transcritos que podem contribuir para a diversidade funcional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular da CD59 madura (aa 26–128), sugerindo que o anticorpo reconhece principalmente a forma nativa ancorada por GPI nas superfícies celulares e formas solúveis que carecem da âncora GPI.
• Para análise de Western blot de lisados de células ou tecidos humanos, espera-se uma banda em aproximadamente 14 kDa; no entanto, a N-glicosilação pode resultar em uma banda alargada ou um peso molecular aparente ligeiramente maior. Considere usar condições redutoras e validar com controles apropriados.
• Em aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado para captura de antígeno ou detecção de CD59 em soro humano, plasma ou preparações de proteína recombinante. Experimentos de titulação (por exemplo, 1–5 µg/mL de revestimento) são recomendados para otimizar as razões sinal-ruído.
• Como um reagente policlonal, confirme a reatividade cruzada entre espécies experimentalmente se estiver estudando modelos não humanos e inclua controles negativos apropriados para levar em conta qualquer ligação inespecífica.

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