Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD59 para WB, ELISA - P13987

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD59

• A glicoproteína CD59, também conhecida como protectina, HRF20, MACIF ou MIRL, é uma glicoproteína de superfície celular ancorada por GPI expressa principalmente em células humanas para proteção contra a lise mediada pelo complemento.
• Funciona como um potente inibidor do complexo de ataque à membrana (MAC) do complemento, prevenindo danos durante a ativação do complemento ao bloquear os passos finais da formação de poros. Referências relacionadas: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111
• Mecanicamente, o CD59 liga-se às regiões beta-hairpin dos componentes C8α e C8β do MAC em montagem, formando uma folha beta intermolecular que impede a incorporação de múltiplas moléculas de C9 necessárias para a formação do poro osmolítico. Referências relacionadas: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:36797260
• Uma forma solúvel do CD59, encontrada na urina e outros fluidos corporais, retém a atividade de ligação ao complemento, mas exibe capacidade inibitória do MAC muito reduzida em comparação com a forma ligada à membrana.
• Subcelularmente, o CD59 está ancorado à membrana celular via um resíduo de GPI e também pode ser encontrado em formas secretadas.
• A proteína contém características estruturais-chave, incluindo múltiplas ligações dissulfeto e sítios de glicação, contribuindo para sua estabilidade e função.
• Variantes genéticas no CD59 estão associadas à anemia hemolítica hereditária, destacando seu papel crítico na proteção dos eritrócitos contra o ataque do complemento.
• O splicing alternativo produz múltiplos isoformas do CD59, potencialmente modulando sua função ou localização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo é um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 49–128 do CD59 humano, direcionando-se a uma região extracelular, tornando-o adequado para detectar a forma nativa ligada à membrana.
• Para Western Blot, espera-se uma banda principal em aproximadamente 14 kDa para o esqueleto peptídico não glicosilado; no entanto, a glicosilação e a adição da âncora GPI podem resultar em espécies de peso molecular mais alto, portanto valide com controles positivos apropriados (por exemplo, soro humano ou membranas de eritrócitos).
• Em aplicações de ELISA, considere emparelhar este anticorpo monoclonal com um clone diferente direcionado a um epítopo distinto para desenvolver um imunoensaio sanduíche sensível para quantificação de CD59.
• Sempre otimize a diluição do anticorpo e as condições experimentais na matriz de amostra relevante para garantir especificidade e minimizar o fundo.

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