Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD62P/P-selectin para WB, IHC-P, IF-P, ELISA - P16109

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da P-selectina

• A P-selectina (SELP), também designada CD62P, GMP-140, LECAM3 e PADGEM, é um membro da família das selectinas de moléculas de adesão celular. É uma glicoproteína transmembranar do tipo I que possui um domínio de lectina do tipo C N-terminal, um domínio semelhante a EGF, múltiplas repetições sushi (SCR) e uma cauda citoplasmática.
• Funciona como um receptor dependente de Ca²⁺ que se liga a ligandos de carboidratos, principalmente o sialil-Lewis X, em células mieloides como neutrófilos e monócitos. Essa interação media a ligação inicial e a rolagem de leucócitos no endotélio ativado e nas plaquetas durante a inflamação.
• Por meio do seu contra-receptor SELPLG (PSGL-1) nos leucócitos, a P-selectina suporta a rolagem de leucócitos ao longo das superfícies vasculares, um pré-requisito crítico para a adesão firme e a extravasão.
• Além disso, a P-selectina facilita as interações célula-célula e a adesão ao se ligar às integrinas αIIb/β3 (ITGA2B:ITGB3) e αV/β3 (ITGAV:ITGB3), contribuindo para a formação de agregados plaqueta-leucócito. Referências relacionadas: PMID:37184585
• Subcelularmente, a P-selectina é armazenada nos grãos-α das plaquetas e nos corpos de Weibel-Palade das células endoteliais. Após a ativação celular por agonistas como a trombina ou a histamina, ela é rapidamente translocada para a membrana plasmática.
• As modificações pós-traducionais incluem a formação de pontes dissulfeto, palmitoilação em resíduos de cisteína citoplasmáticos e glicosilação N-ligada. Palavras-chave: Adesão celular, Cálcio, Ponte dissulfeto, Glicoproteína, Lipoproteína, Membrana, Ligação a metais.
• A proteína tem um peso molecular calculado de aproximadamente 91 kDa e pode apresentar desvios de mobilidade em SDS-PAGE devido à glicosilação heterogênea.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 42–771 da P-selectina humana, correspondendo a quase toda a região extracelular. Esse desenho favorece o reconhecimento de conformações nativas em aplicações baseadas em células.
• Para Western blotting, recomenda-se o uso de condições redutoras e um padrão de peso molecular próximo a 91 kDa. Devido à glicosilação, a banda pode aparecer difusa ou migrar ligeiramente para cima.
• Em imuno-histoquímica (parafina), recomenda-se a recuperação de antígeno (baseada em calor ou enzima); valide a especificidade do anticorpo em tecido inflamado onde a expressão de P-selectina está upregulada.
• Para imunofluorescência, a permeabilização permite a detecção tanto dos estoques intracelulares quanto da proteína translocada para a superfície. A co-localização com marcadores de organelas (por exemplo, fator de von Willebrand para corpos de Weibel-Palade) pode ser instrutiva.
• Como anticorpo monoclonal de coelho, este produto é compatível com protocolos de coloração multiplex usando anticorpos primários de camundongo.

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