Anticorpo Monoclonal Anti-CD63 para WB, IHC-P, ELISA - P08962

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD63

• O CD63 é um membro da superfamília das tetraspaninas, também conhecido como granulofisina, LAMP-3, ME491 e Tspan-30, e desempenha papéis diversos na adesão celular, sinalização e tráfego vesicular.
• Ele atua como receptor de superfície celular para TIMP1, ativando a sinalização a jusante por meio das vias ITGB1/integina que promovem a sobrevivência celular, migração e reorganização do citoesqueleto via AKT, FAK/PTK2 e quinases MAP.
• O CD63 participa da sinalização de VEGFA ao regular a internalização de KDR/VEGFR2, e é essencial para o tráfego normal do domínio luminal de PMEL requerido para o desenvolvimento e maturação dos melanócitos.
• A proteína está localizada na membrana celular, membranas lisossomais e endossomais tardias, corpos multivesiculares e melanossomos, e pode ser secretada em exossomos extracelulares, refletindo seu envolvimento tanto no transporte intracelular quanto na comunicação intercelular.
• O CD63 é extensivamente glicosilado e palmitoilado, com um peso molecular observado que varia de 17 kDa a 25 kDa devido à glicosilação variável, que é crítica para seu tráfego e interações funcionais.
• A expressão tecidual é proeminente em plaquetas, melanócitos (nevos displásicos, melanomas primários), células hematopoiéticas e macrófagos teciduais, destacando sua relevância na biologia do câncer e das células imunes.
• Ele contribui para a extravasamento de leucócitos ao regular o tráfego de SELP para a superfície endotelial, e pode modular a degranulação de mastócitos especificamente por meio da estimulação de Ms4a2/FceRI.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para western blotting, prepare as amostras em condições redutoras e esteja ciente de que o CD63 migra como uma banda difusa ou múltiplas bandas entre 17–25 kDa devido à sua glicosilação heterogênea; valide a especificidade com controles apropriados.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), métodos robustos de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0, induzido por calor) são recomendados devido à natureza transmembrana do antígeno; teste em tecidos conhecidos por serem positivos, como melanoma ou cortes ricos em plaquetas.
• Para aplicações em ELISA, pareie este anticorpo com reagentes de detecção apropriadamente combinados e confirme a linearidade e sensibilidade usando padrões de CD63 recombinante ou amostras biológicas como lisados de células ou preparações de exossomos.
• Como o imunógeno corresponde à grande alça extracelular (aminoácidos 103-203), o anticorpo provavelmente reconhece um epitopo acessível em condições nativas e desnaturadas; considere isso ao projetar estratégias de captura ou detecção.

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