Anticorpo Policlonal Anti-CD63 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08962

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD63

• O CD63, também conhecido como granulofisina, LAMP-3, Limp1, ME491, OMA81H e Tspan-30, é um membro da superfamília das tetraspaninas, caracterizada por quatro domínios transmembrana e duas alças extracelulares.
• Funciona como um receptor de superfície celular para TIMP1 e desempenha um papel fundamental na ativação de cascatas de sinalização, incluindo a sinalização de integrina através do ITGB1, levando à ativação de AKT, FAK/PTK2 e quinases MAP, promovendo assim a sobrevivência, adesão, espalhamento e migração celular.
• O CD63 está envolvido no transporte vesicular intracelular e é essencial para o tráfego normal do domínio luminal do PMEL, o que é crítico para o desenvolvimento e maturação dos melanócitos.
• Regula a adesão de leucócitos a células endoteliais modulando o tráfego de SELP, e pode desempenhar um papel na desgranulação de mastócitos através da estimulação de Ms4a2/FceRI.
• Subcelularmente, o CD63 está localizado principalmente nas membranas lisossomais e endossomais tardias, mas também é encontrado em corpos multivesiculares, melanossomos, exossomos extracelulares secretados e na superfície celular.
• A proteína é altamente glicosilada e palmitoilada, características importantes para seu tráfego e função, e é expressa diferencialmente em plaquetas, células hematopoiéticas, macrófagos teciduais e células de melanoma.
• O splicing alternativo gera isoformas do CD63, que podem ter funções e localizações distintas.
• Palavras-chave associadas ao CD63 incluem glicoproteína, lipoproteína, membrana, transporte proteico e secretado, refletindo seus diversos papéis nos processos celulares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde aos aminoácidos 103–203 do CD63 humano, uma região que abrange parte da grande alça extracelular. Este desenho pode permitir o reconhecimento tanto da proteína de comprimento total quanto de possíveis produtos de clivagem; valide no sistema de amostra relevante.
• Para Western blot, considere que o CD63 é altamente glicosilado, o que pode fazer com que seu peso molecular aparente mude para acima dos 26 kDa previstos. Garanta uma deglicosilação proteica adequada ou use controles positivos para confirmar a identidade da banda.
• O anticorpo é qualificado para IHC-P e IF/ICC; otimize as condições de recuperação antigênica e permeabilização, especialmente considerando a localização intracelular do CD63 em endossomos e lisossomos.
• Para ELISA, avalie o desempenho do anticorpo com CD63 recombinante ou nativo no seu formato de ensaio específico, pois a ligação pode ser influenciada pela conformação proteica e modificações pós-traducionais.
• A expressão do CD63 está elevada em exossomos; portanto, este anticorpo pode ser útil para estudos de isolamento ou caracterização de exossomos quando validado adequadamente.

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