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Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD68 para WB, IF-P, FC (intra), ELISA - P34810

Número do item : CM0003685

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Aplicação
WB, IF-P, FC (intra), ELISA
Reatividade Cruzada
Humano, Rato, Camundongo
Peso da Proteína
37kDa
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Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Parâmetro Valor
Nome do Produto Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD68
Observações/Alias GP110; LAMP4; SCARD1; CD68
Espécie Humano
GeneID (Humano) 968
GeneID 968
Imunogênio Péptido sintético correspondente a uma sequência dentro dos aminoácidos 100-200 do CD68 humano (NP_001242.2)
Fonte Coelho
Categoria Anticorpos Monoclonais
Aplicação WB, IF-P, FC (intra), ELISA
Reatividade Cruzada Humano, Camundongo, Rato
SWISS P34810
Peso Molecular da Proteína 37kDa
Envio Saco de gelo

Contexto Biológico: Função e Localização do CD68

  • O CD68, também conhecido como macrosialina, GP110, LAMP4 e SCARD1, é uma proteína transmembranar do tipo I altamente glicosilada pertencente à família das proteínas associadas à membrana do lisossoma (LAMP).
  • Está predominantemente localizado nas membranas de endossomas e lisossomas, mas pode reciclar para a superfície celular, permitindo uma apresentação rápida na membrana plasmática de macrófagos.
  • A proteína desempenha um papel crítico na fagocitose, mediando o metabolismo lisossomal intracelular do material englobado e participando em interações extracelulares com patógenos e outras células.
  • O CD68 liga-se a lectinas ou selectinas específicas de tecidos e órgãos, o que facilita a migração dirigida de subconjuntos de macrófagos para locais anatômicos específicos e suporta a adesão e migração de macrófagos.
  • Acredita-se que a reciclagem rápida do CD68 de endossomas e lisossomas para a membrana plasmática auxilie os macrófagos a rastejarem sobre substratos ou outras células que expressem selectinas.
  • Embora expresso fortemente em monócitos sanguíneos e macrófagos teciduais, o CD68 também é detectado em linfócitos, fibroblastos, células endoteliais e muitas linhas celulares tumorais, onde pode promover a disseminação de células tumorais ao se ligar a selectinas vasculares.
  • A proteína apresenta múltiplos domínios N-terminais semelhantes à mucina, uma única hélice transmembranar e uma curta cauda citoplasmática, com extensa glicosilação N- e O- e várias ligações dissulfeto intramoleculares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

  • O imunogénio é um péptido sintético que abrange os resíduos 100–200 do CD68 humano (NP_001242.2). A conservação da sequência nesta região provavelmente está na base da reatividade cruzada com camundongo e rato.
  • Para Western blot (WB), o peso molecular previsto da cadeia principal não glicosilada é de ~37 kDa, mas as formas altamente glicosiladas frequentemente migram com pesos moleculares aparentes mais elevados (80–110 kDa). Recomenda-se o uso de bloqueio apropriado e marcadores de peso molecular.
  • Em imunofluorescência (IF-P) e citometria de fluxo intracelular (FC), a permeabilização é essencial porque o CD68 reside principalmente em compartimentos endossomais e lisossomais; a coloração de superfície requer consideração da dinâmica de reciclagem.
  • O desempenho no ELISA depende da acessibilidade do epítopo; efeitos de matriz e condições de revestimento devem ser otimizados, pois a glicosilação pesada pode mascarar ou alterar a ligação do anticorpo.
  • Dada a ampla expressão nas linhagens de monócitos/macrófagos, inclua controles positivos relevantes (por exemplo, células THP-1 ou RAW 264.7) e controles de isotipo para confirmar a especificidade no sistema de amostra desejado.

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Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD68 para WB, IF-P, FC (intra), ELISA - P34810


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