Anticorpo Policloonal de Coelho Anti-CD68 para WB, IF/ICC, ELISA - P34810

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CD68

• CD68, também conhecida como macrosialina, GP110, LAMP4 ou SCARD1, é uma glicoproteína transmembrana altamente glicosilada pertencente à família LAMP.
• Ela é expressa predominantemente na membrana de endossomos e lisossomos, mas também pode reciclar rapidamente para a superfície celular, o que sugere um papel na adesão e na motilidade celular.
• CD68 atua nas atividades fagocíticas dos macrófagos, participando tanto do metabolismo lisossomal intracelular quanto das interações extracelulares célula-célula e célula-patógeno.
• Ao se ligar a lectinas ou selectinas específicas de tecidos e órgãos, a CD68 facilita o direcionamento de subconjuntos de macrófagos para locais anatômicos específicos.
• A proteína contém um domínio semelhante à mucina que provavelmente está envolvido na ligação ao ligante e pode mediar a fixação a selectinas em células endoteliais, auxiliando na disseminação de macrófagos e células tumorais.
• CD68 é altamente expressa em monócitos sanguíneos e macrófagos teciduais, e também é encontrada em linfócitos, fibroblastos, células endoteliais e várias linhagens de células tumorais.
• Múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação N-ligada e pontes dissulfeto, contribuem para sua estabilidade estrutural e alteram o peso molecular para aproximadamente 110 kDa (a forma glicosilada madura), embora a proteína central prevista seja de cerca de 37 kDa.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, que podem ter funções ou padrões de expressão distintos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (proteína recombinante correspondente aos aminoácidos 16–200) tem como alvo a região extracelular N-terminal; o anticorpo pode reconhecer tanto a proteína central quanto a forma glicosilada madura.
• Para Western blot (WB), é aconselhável testar condições redutoras e não redutoras, e observar que a banda observada pode migrar entre 37 kDa (proteína central) e 110 kDa (forma glicosilada), dependendo da amostra e das condições experimentais.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), espere um padrão de coloração consistente com endossomos, lisossomos e membrana celular; os protocolos de fixação e permeabilização devem ser otimizados para o tipo de célula.
• Aplicações em ELISA podem exigir condições adequadas de revestimento e bloqueio; considere o pareamento com um anticorpo de detecção adequado para ensaios sanduíche.
• Valide o anticorpo nas espécies relevantes (humano, camundongo, rato) e em amostras de controle positivo apropriadas, como linhagens de células de macrófagos (por exemplo, THP-1, RAW 264.7) ou células mononucleares do sangue periférico.

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