PolymAb® de Coelho Anti-CD68 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P34810 / P31996

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD68

• A macrosialina (CD68) é uma glicoproteína transmembranar altamente glicosilada pertencente à família das proteínas de membrana associadas aos lisossomos (LAMP), também conhecida como Lamp4, gp110 e Scard1. A proteína central tem um peso molecular calculado de ~37 kDa, mas a extensa glicosilação ligada a N e O resulta em um tamanho aparente de 70–130 kDa em SDS-PAGE.
• O CD68 é expresso predominantemente nas membranas endossomais e lisossomais de monócitos e macrófagos teciduais, onde participa do metabolismo fagocítico e lisossomal intracelular.
• Ao se ligar a lectinas ou selectinas específicas de tecidos e órgãos, o CD68 facilita o direcionamento de macrófagos para locais de inflamação ou lesão e pode permitir a movimentação celular sobre substratos revestidos de selectinas por meio da reciclagem rápida entre compartimentos endolisossomais e a membrana plasmática.
• Além dos macrófagos, o CD68 é expresso em níveis mais baixos em linfócitos, fibroblastos, células endoteliais e muitas linhas de células tumorais, potencialmente auxiliando na adesão das células tumorais ao endotélio vascular e na disseminação metastática.
• As modificações pós-tradução incluem formação de pontes dissulfeto, glicosilação intensa e um peptídeo sinal clivável, contribuindo para sua maturação e tráfego membranar.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas do CD68, e seu repertório funcional é expandido ainda mais por meio de interações com componentes da matriz extracelular e receptores de adesão celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que cobre o CD68 humano e de camundongo, sugerindo ampla reatividade cruzada; no entanto, os pesquisadores devem validar a reatividade em seus sistemas de amostras específicos.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda larga entre 70 e 130 kDa devido à glicosilação variável; inclua um controle positivo, como lisados de macrófagos, e considere o uso de géis SDS-PAGE de 8–12% para resolução ideal.
• Em IHC-P e IF/ICC, a detecção eficaz pode exigir etapas de recuperação de antígeno (por calor ou enzima) e permeabilização para acessar a localização endossomal/lisossomal intracelular.
• Para ELISA, o pareamento com um anticorpo de detecção compatível é essencial; a CamelBio oferece pares de anticorpos validados para apoiar o desenvolvimento rápido de ensaios.
• Como o CD68 é um marcador de macrófagos bem estabelecido, a coloração dupla com outros marcadores de linhagem (por exemplo, CD163, CD11b) pode ajudar a delimitar subconjuntos de macrófagos em cortes de tecido.

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