Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CD74 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P04233

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD74

• O CD74, também conhecido como cadeia gama do antígeno de histocompatibilidade de classe II do HLA ou cadeia invariante (Ii), é uma chaperona crítica no processamento e apresentação de antígenos da MHC classe II. Serve como um receptor de superfície celular para o fator inibitório da migração de macrófagos (MIF).
• A proteína se liga ao sítio de ligação de peptídeos dos heterodímeros alfa/beta da MHC classe II, formando um complexo alfa-beta-CLIP que impede o carregamento prematuro de peptídeos até que o HLA-DM facilite a liberação do CLIP no endossomo.
• O CD74 estabiliza a conformação da catepsina L (CTSL) madura, ligando-se ao seu sítio ativo, atuando como uma chaperona para manter um pool da enzima ativa em compartimentos endocíticos e no espaço extracelular de células apresentadoras de antígenos.
• A isoforma p41 do CD74 demonstra atividade antiviral, bloqueando a entrada endossomal do vírus Ebola e coronavírus, incluindo o SARS-CoV-2, através da interrupção do processamento da glicoproteína viral mediado por catepsina. Referências relacionadas: PMID:32855215
• Subcelularmente, o CD74 é encontrado na membrana celular, retículo endoplasmático, aparelho de Golgi, rede trans-Golgi, endossomos e lisossomos; também é secretado.
• Em células B, duas isoformas principais representam aproximadamente 10% e 70% da expressão total de CD74, respectivamente.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, glicosilação, ligação a proteoglicanos e formação de ligações dissulfeto, conforme indicado pela anotação da UniProt.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 73-232 do CD74 humano (NP_004346.1), cobrindo a região CLIP; verifique a conservação da sequência se for usar em espécies diferentes de humano e rato.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de 34 kDa, mas a glicosilação e variantes de isoformas podem causar deslocamentos de banda; valide a detecção no seu sistema experimental.
• Em imuno-histoquímica-parafina (IHC-P), considere otimizar os protocolos de recuperação antigênica, pois o CD74 se localiza em múltiplos compartimentos intracelulares.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), as condições de permeabilização devem ser testadas devido à localização combinada de membrana e intracelular do CD74.
• Ao usar ELISA, observe que o CD74 pode ser secretado; recomenda-se preparação de amostra adequada e validação do ensaio.

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