Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CD90.1 para WB, ELISA - P01831

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Glicoproteína de Membrana Thy-1

• A glicoproteína de membrana Thy-1, também conhecida como CD90, é uma proteína de superfície celular ancorada por GPI pertencente à superfamília das imunoglobulinas.
• Em camundongos, o Thy-1 existe como duas variantes alélicas principais, Thy1.1 (CD90.1) e Thy1.2 (CD90.2); este anticorpo tem como alvo o alelo CD90.1, conforme indicado pelo design do seu imunógeno.
• O Thy-1 pode mediar interações célula-célula ou célula-ligando, particularmente durante a sinaptogênese e outros processos no cérebro (com base na anotação funcional do UniProt).
• A proteína é localizada na membrana celular e está ligada via uma âncora de glicosilfosfatidilinositol (GPI), que a direciona para rafts lipídicos.
• Contém um único domínio de imunoglobulina do tipo V, apresenta uma ligação dissulfeto e sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação e formação de ácido pirrolidona carboxílico no terminal N.
• A proteína madura tem um peso molecular de aproximadamente 18 kDa (com base na entrada do UniProt), consistente com a banda de ~18 kDa observada em SDS-PAGE em condições redutoras.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal de coelho foi produzido contra uma proteína de fusão recombinante cobrindo os aminoácidos 20-120 do CD90.1 de camundongo (NP_033408.1), que abrange o domínio extracelular do tipo imunoglobulina.
• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda de ~18 kDa em tecidos de camundongo ou linhagens celulares que expressam CD90.1; recomenda-se a inclusão de controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, tecidos de linhagens de camundongo Thy1.1 vs. Thy1.2).
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como anticorpo de captura ou detecção; as concentrações de revestimento e títulos ideais devem ser determinados empiricamente.
• Anticorpos policlonais podem apresentar variabilidade de lote para lote; recomendamos validar cada novo lote no sistema de ensaio pretendido.
• A localização na superfície celular do Thy-1 via âncora GPI pode exigir condições de lise suaves para preservar a solubilidade; considere o uso de detergentes não desnaturantes se a fracionamento de membrana for realizado.
• A especificidade do anticorpo pode ser confirmada por imunoprecipitação acoplada com espectrometria de massa ou por testes em lisados de células/tecidos com knockout de CD90.1, se disponíveis.
• Armazene conforme recomendado (envio em saco de gelo; armazenamento a longo prazo a -20°C ou -80°C) e evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento para manter a atividade.

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