Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD95 para ELISA, FC - P25446

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD95

• O CD95 (FAS, Apo-1) é um membro da superfamília de receptores do fator de necrose tumoral, uma proteína transmembrana que medeia a apoptose após a ligação ao seu ligante FASLG.
• O domínio de morte intracelular do receptor recruta FADD e caspase-8, formando o complexo de sinalização indutor de morte (DISC) que desencadeia cascatas apoptóticas.
• A apoptose mediada por FAS é crítica para a tolerância periférica e o suicídio de células T maduras estimulado por antígenos.
• Localizado na membrana celular e em rafts de membrana, o CD95 é expresso em vários tecidos de camundongo, incluindo timo, fígado, pulmão, coração e ovário adulto.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, lipidação (palmitato) e fosforilação; a proteína contém ligações dissulfeto e um peptídeo sinal.
• A proteína madura tem um peso molecular previsto de aproximadamente 37 kDa, que pode parecer maior em condições redutoras devido à glicosilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 22-169) abrange o domínio extracelular, tornando este anticorpo adequado para detectar o CD95 de superfície em condições nativas e desnaturantes.
• Para ELISA, considere revestir com fusão recombinante de CD95-Fc ou usar lisados celulares; titule o anticorpo de 0,1-1 µg/mL como ponto de partida.
• Na citometria de fluxo, use 0,5-2 µg por 10^6 células; inclua controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio para minimizar a ligação inespecífica.
• Valide a especificidade do anticorpo usando modelos de camundongo CD95 knockout ou linhagens celulares para confirmar o reconhecimento do alvo.
• Note que os níveis de expressão endógena de CD95 variam entre tecidos e estados de ativação; experimentos piloto são recomendados.

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