Anticorpo Monoclonal Anti-CD95/FAS para WB, IF/ICC, ELISA - P25445

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD95/FAS

• O CD95/FAS é um membro da superfamília dos receptores do fator de necrose tumoral (TNFRSF6), também conhecido como antígeno Apo-1 ou antígeno de superfície mediador da apoptose FAS.
• Ele funciona como receptor para TNFSF6/FASLG e, após a ligação ao ligante, recruta FADD e caspase-8 para formar o complexo de sinalização indutor da morte (DISC), iniciando a apoptose.
• A apoptose mediada por FAS desempenha papel na indução da tolerância periférica e no suicídio de linfócitos T maduros estimulados por antígenos.
• O gene produz múltiplas isoformas por splicing alternativo; as isoformas secretadas 2 a 6 podem bloquear a apoptose in vitro.
• A localização subcelular inclui membrana celular, domínios de membrana (membrane rafts) e formas secretadas; a localização específica por isoforma influencia a sinalização.
• Em células mononucleares de sangue periférico em repouso, a isoforma 1 e a isoforma 6 são expressas em níveis iguais; após a ativação, a isoforma 1 aumenta enquanto a isoforma 6 diminui.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, palmitoilação, fosforilação e formação de pontes dissulfeto, contribuindo para a função e estabilidade do receptor.
• Mutações no FAS estão associadas à síndrome linfoproliferativa autoimune (ALPS), destacando seu papel essencial na homeostase imunológica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 26-173), portanto, espera-se que o anticorpo reconheça as isoformas de CD95/FAS ligadas à membrana e possivelmente as secretadas.
• Para Western blot, antecipe múltiplas bandas entre 9-38 kDa devido ao splicing alternativo, glicosilação e clivagem; considere usar condições redutoras e marcadores de peso molecular apropriados.
• Em IF/ICC, o CD95/FAS localiza-se principalmente na membrana plasmática e nos domínios de membrana; garanta a otimização da permeabilização se for detectar pools intracelulares.
• Valide o anticorpo no seu sistema de amostra específico, pois os níveis de expressão podem variar conforme o tipo de célula e o estado de ativação.

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