Anticorpo Policlonal Anti-CD99 para WB, ELISA - P14209

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD99

• O CD99, também conhecido como MIC2 ou glicoproteína de superfície de células T E2, é uma proteína transmembrana altamente glicosilada que pertence à família CD99. Sofre splicing alternativo, gerando múltiplos isoformas.
• A proteína é expressa principalmente na superfície das células T, onde medeia a adesão célula-célula. Está envolvida na formação espontânea de rosetas entre células T e eritrócitos, um fenómeno imunológico clássico.
• O CD99 desempenha um papel crítico no extravasamento de leucócitos, especificamente na etapa em que os leucócitos transmigram através da membrana basal endotelial. Funciona no mesmo local, mas independentemente do PECAM-1.
• A proteína está localizada na membrana plasmática como uma proteína transmembrana do tipo I, com um domínio extracelular que medeia interações adesivas e uma cauda citoplasmática curta implicada na sinalização.
• O CD99 está sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e extensa glicosilação, que modulam a sua função e peso molecular. A glicoproteína madura corre aproximadamente a 32 kDa em SDS-PAGE, embora o peso da proteína central seja de cerca de 19 kDa.
• Estudos estruturais (estrutura 3D) forneceram informações sobre a base molecular da adesão mediada pelo CD99, e o sequenciamento direto de proteínas confirmou a sua identidade e processamento.
• Embora melhor caracterizado em células T, o CD99 também é expresso noutros leucócitos e células endoteliais, contribuindo para a vigilância imunológica e respostas inflamatórias.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo policlonal corresponde à região extracelular N-terminal (aa 23–124), que inclui parte do domínio de adesão. Para WB, este anticorpo pode detetar bandas correspondentes a isoformas diferencialmente glicosiladas; considere usar uma etapa de desglicosilação para confirmar o tamanho da proteína central.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para capturar ou detetar CD99 nativo em lisados celulares ou preparações de proteína purificada. Recomenda-se a otimização das condições de revestimento e bloqueio para minimizar a ligação inespecífica.
• Para coloração de tecidos ou células, valide o anticorpo no sistema de amostra humana relevante (por exemplo, células T Jurkat, células mononucleares do sangue periférico) e inclua controlos apropriados, como IgG correspondente ao isotipo ou amostras bloqueadas com péptido para confirmar a especificidade.

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