Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD99 para WB, IF/ICC, IHC-P, FC, ELISA - P14209

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD99

• O CD99, também conhecido como MIC2, HBA71, MIC2X, MIC2Y, MSK5X, é uma glicoproteína de superfície celular codificada pelo gene CD99 (também conhecido como MIC2, MIC2X, MIC2Y). Foi originalmente identificado como o antígeno E2 em células T.
• A proteína está envolvida nos processos de adesão de células T e na formação espontânea de rosetas com eritrócitos, desempenhando um papel em uma etapa tardia da extravasação de leucócitos, ajudando os leucócitos a superar a membrana basal endotelial, agindo de forma independente do PECAM1.
• O CD99 sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas que podem ter funções distintas.
• Localização subcelular: O CD99 é uma proteína transmembrana encontrada predominantemente na membrana plasmática.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação e fosforilação, que podem regular suas funções de adesão.
• A proteína principal tem um peso molecular previsto de aproximadamente 18,8 kDa, mas devido à glicosilação, migra a 16-19 kDa em SDS-PAGE.
• O CD99 é expresso em uma ampla gama de células hematopoiéticas e é usado como marcador diagnóstico para sarcoma de Ewing e tumores neuroectodérmicos primitivos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado que o imunógeno corresponde ao domínio extracelular N-terminal (aminoácidos 24-123), o anticorpo provavelmente reconhece a forma nativa, não permeabilizada, do CD99, tornando-o adequado para coloração de superfície em citometria de fluxo e imunofluorescência.
• Para Western blotting, espere uma banda em torno de 16-19 kDa; o uso de condições redutoras pode ajudar a resolver as formas glicosiladas. Valide a especificidade com linhagens celulares positivas e negativas ou knockdown por siRNA.
• Em IHC-P, a recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor em tampão citrato) pode melhorar a detecção; a titulação é recomendada.
• Para IF/ICC, tanto a coloração de células fixas quanto vivas pode ser testada; se usar fixação, a permeabilização suave pode ser opcional, uma vez que o epítopo é extracelular.
• Sempre inclua controles de isotipo apropriados e confirme a reatividade cruzada apenas para humano, conforme especificação do produto.

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