Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CDC16 para IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13042

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDC16

• CDC16 (APC6) é uma subunidade central do complexo promotor da anáfase/ciclossomo (APC/C), uma ligase E3 de ubiquitina multissubunidade essencial para a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:18485873
• O APC/C medeia a ubiquitinação e a subsequente degradação proteassômica de reguladores essenciais do ciclo celular, catalisando principalmente cadeias de poliubiquitina ligadas por 'Lys-11' e, em menor grau, cadeias ligadas por 'Lys-48' e 'Lys-63'. Também pode montar cadeias ramificadas 'Lys-11'/'Lys-48' nos substratos. Referências relacionadas: PMID:18485873, PMID:29033132
• A ativação do APC/C pelo CDC20 na metáfase desencadeia a degradação da securina e da ciclina B, promovendo a transição para a anáfase e a saída da mitose. Referências relacionadas: PMID:27120157, PMID:27509861
• A atividade do APC/C é inibida pelo complexo de checkpoint mitótico (MCC) para garantir a segregação cromossômica correta até que todos os cinetócoros estejam devidamente ligados. Referências relacionadas: PMID:27509861
• O CDC16 localiza-se no citoplasma, nos centrossomos e no fuso mitótico durante a divisão celular, em conformidade com seu papel na regulação mitótica.
• O CDC16 pertence a uma família de subunidades do APC/C caracterizadas por domínios de repetição tetratricopeptídica (TPR), que medeiam interações proteína-proteína.
• A proteína sofre fosforilação, o que pode regular sua atividade ou suas interações dentro do complexo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 200-300 do CDC16 humano. Essa sequência interna pode ser adequada para a detecção do CDC16 de comprimento completo em aplicações de western blot; embora essa aplicação não esteja incluída na lista padrão, considere validá-la para análise de proteínas desnaturadas, considerando o peso molecular previsto de aproximadamente 72 kDa.
• Para IHC-P, considere utilizar recuperação antigênica induzida por calor (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0) e otimize a concentração do anticorpo primário.
• Em IF/ICC, assegure uma fixação adequada (por exemplo, paraformaldeído a 4%) e a permeabilização para permitir o acesso ao CDC16 citoplasmático e centrossomal.
• O ELISA pode ser utilizado para quantificar o CDC16; faça a titulação do anticorpo e valide a reatividade cruzada com as espécies-alvo (humano, camundongo, rato).

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