Anticorpo Policlonal Anti-CDC20 para WB, IF/ICC, ELISA - Q12834

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDC20

• O CDC20 é um adaptador e ativador específico de substrato do complexo promotor da anáfase/ciclossomo (APC/C), direcionando substratos para ubiquitinação e degradação. Referências relacionadas: PMID:9734353 PMID:27030811 PMID:29343641

• É essencial para a transição metáfase/anáfase, direcionando a ciclina B e a securina para degradação. Referências relacionadas: PMID:27120157 PMID:27509861 PMID:32666501

• Reconhece motivos de caixa de destruição (D box), caixa KEN e motivos ABBA em substratos, guiando o reconhecimento específico. Referências relacionadas: PMID:29343641 PMID:27509861

• Componente do complexo do ponto de verificação mitótico (MCC), que inibe o APC/C até que os cromossomos estejam devidamente ligados ao fuso mitótico. Referências relacionadas: PMID:27509861

• O MCC inclui CDC20, MAD2L1, BUB1B e BUB3; atrasa a transição metáfase/anáfase. Referências relacionadas: PMID:9811605 PMID:9637688 PMID:27509861

• Quando o ponto de verificação do fuso é silenciado, o CDC20 é auto-ubiquitinado no MCC, reativando o APC/C para a anáfase. Referências relacionadas: PMID:27509861

• Subcelularmente, o CDC20 localiza-se no citoplasma, centrossoma, cinetocoro e pólo do fuso durante a mitose.

• O CDC20 contém repetições WD e é regulado por acetilação, fosforilação e ubiquitinação; mutações estão associadas a doenças.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio (aminoácidos 1–270) cobre a região N-terminal, que pode estar envolvida no reconhecimento do substrato; o anticorpo pode reconhecer tanto as formas nativas quanto as desnaturadas.
• Para Western blot, espera-se uma banda próxima a 55 kDa; considere usar lisados de células mitóticas para enriquecer o CDC20.
• Na imunofluorescência, a coloração deve ser observada em estruturas mitóticas, como cinetocoros e pólos do fuso; valide em células sincronizadas.
• A reatividade cruzada com rato permite estudos em modelos murinos; verifique a reatividade em sua linhagem específica, se necessário.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e a titulação do anticorpo para o formato do seu ensaio.
• Como um anticorpo policlonal, é possível haver variabilidade entre lotes; inclua controles apropriados e considere a purificação por afinidade, se necessário.

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