Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CDC25A para WB, ELISA - P30304

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDC25A

• CDC25A (Fosfatase 1 indutora de fase M, também conhecida como Fosfatase de dupla especificidade Cdc25A) é um regulador chave da progressão do ciclo celular.
• Ela funciona como indutor dependente de dosagem da progressão mitótica por meio da sua atividade de tirosina fosfatase. Referências relacionadas: PMID:12676925 PMID:14559997 PMID:1836978
• CDC25A desfosforila e ativa diretamente o CDK1, uma quinase mitótica principal. Referências relacionadas: PMID:20360007
• Ela também desfosforila o CDK2 em complexo com a ciclina E, contribuindo para a regulação da transição G1/S. Referências relacionadas: PMID:20360007
• A proteína sofre splicing alternativo, gerando múltiplas isoformas com funções potencialmente distintas.
• CDC25A é uma fosfoproteína regulada pela conjugação de ubiquitina (conjugação Ubl), que a direciona para degradação proteassomal durante os pontos de verificação de danos no DNA.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, o peso molecular previsto das isoformas de CDC25A é de 54 a 59 kDa; considere usar lisados de controle positivo de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato e otimizar as condições de transferência para uma resolução clara de bandas.
• Uma gama de concentrações de anticorpo primário (por exemplo, 0,5 a 2 µg/mL) deve ser testada para determinar a relação sinal-ruído ideal em configurações de WB e ELISA.
• Valide a reatividade cruzada em amostras de camundongo e rato usando extratos de tecido ou células apropriados para confirmar o desempenho específico por espécie.
• Para aplicações de ELISA, o pareamento deste anticorpo com um anticorpo de detecção compatível pode aumentar a sensibilidade; execute curvas de calibração com a proteína recombinante alvo para avaliar a linearidade do ensaio.

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