Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CDC25C para WB, ELISA - P30307

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDC25C

• CDC25C (fosfatase indutora da fase M 3) é uma fosfatase de especificidade dupla que desempenha um papel crítico na regulação do ciclo celular, especificamente na transição G2/M.
• Funciona como um indutor dependente de dosagem no controle mitótico; quando fosforilado, ele conduz potente células G2 para a prófase, desfosforilando e ativando diretamente a quinase CDK1. Referências relacionadas: PMID:8119945
• A proteína está localizada predominantemente no núcleo, consistente com seu papel na regulação dos eventos nucleares da mitose.
• O CDC25C está sujeito à fosforilação regulatória, e sua atividade é finamente ajustada durante o ciclo celular; também é acetilado e sofre splicing alternativo.
• Como membro da família de fosfatases proteicas, pertence à classe mais ampla de hidrolases e está implicado em interações hospedeiro-vírus, embora os mecanismos detalhados ainda precisem ser totalmente elucidados.
• A isoforma canônica tem um peso molecular previsto de aproximadamente 53 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 20–130 do CDC25C humano, uma região que pode ser conservada entre espécies; portanto, espera-se que o anticorpo reaja de forma cruzada com CDC25C de camundongo e rato com base nos dados do fornecedor. No entanto, o alinhamento de sequências deve ser verificado para seu modelo específico.
• Para Western blotting (WB), é esperada uma banda correspondente à proteína de ~53 kDa; no entanto, eventos de fosforilação podem causar pequenos deslocamentos de mobilidade. Considere o uso de inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar os estados de modificação nativos.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para detectar CDC25C recombinante ou endógeno; recomenda-se o emparelhamento com um sistema de detecção adequado e uma curva padrão para quantificação.
• Sendo um anticorpo policlonal, existe variabilidade potencial de lote para lote; é aconselhável pré-validar cada novo lote em seu sistema de ensaio.
• Sempre inclua controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisados com superexpressão de CDC25C ou amostras de knockdown) para confirmar a especificidade.

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