Anticorpo Monoclonal Anti-CDC27 para WB, ELISA - P30260

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDC27

• O CDC27, também conhecido como APC3 ou ANAPC3, é uma subunidade central do complexo promotor da anáfase/ciclossomo (APC/C), uma grande ligase de ubiquitina E3 essencial para a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:18485873 PMID:27120157 PMID:27509861
• O APC/C media a ubiquitinação de proteínas alvo, formando principalmente cadeias de poliubiquitina ligadas a Lys-11, mas também cadeias ligadas a Lys-48 e Lys-63, bem como cadeias ramificadas Lys-11/Lys-48, para desencadear a degradação proteassomal. Referências relacionadas: PMID:18485873 PMID:29033132
• Durante a transição da metáfase para a anáfase, o APC/C é ativado pela CDC20, levando à degradação da ciclina B e da segurança, impulsionando assim a segregação cromossômica e a saída da mitose. Referências relacionadas: PMID:27120157 PMID:27509861
• A atividade do APC/C é rigorosamente regulada pelo complexo de verificação mitótica (MCC), que inibe o APC/C até que todos os cromossomos estejam devidamente ligados ao fuso, prevenindo o início prematuro da anáfase. Referências relacionadas: PMID:27509861
• O CDC27 localiza-se no núcleo, citoplasma e fuso mitótico, consistente com seus papéis dinâmicos nos pontos de verificação do ciclo celular e na dinâmica cromossômica.
• A proteína contém repetições TPR e está sujeita a fosforilação, destacando suas interações regulatórias e controle pós-traducional dentro da holoenzima APC/C.
• O splicing alternativo gera múltiplos isoformas, expandindo a diversidade funcional do CDC27 em diferentes contextos celulares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 702–824 do CDC27 humano, uma região provavelmente exposta na proteína nativa; este projeto pode favorecer a detecção de formas endógenas e recombinantes no WB.
• No WB, espera-se uma banda próxima a 92 kDa; confirme a especificidade usando controles positivos (ex.: lisado de células HeLa) e negativos apropriados, e considere usar um controle de carga.
• Para aplicações de ELISA, valide a ligação contra a região do epítopo específico ou o CDC27 de comprimento total para garantir a sensibilidade e especificidade do ensaio.
• A reatividade cruzada com o CDC27 de camundongo está indicada; teste em amostras relevantes de tecido ou linhagem celular de camundongo se o alvo forem ortólogos murinos.

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