Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CDK1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P06493

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CDK1

• CDK1 (Quinase 1 dependente de ciclina) é a subunidade catalítica do fator promotor da fase M (MPF), essencial para a transição G2-M e o início da mitose. Ela fosforila inúmeros substratos para impulsionar a separação do centrossomo, a dinâmica do Golgi, a quebra do envelope nuclear e a condensação cromossômica. Referências relacionadas: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720 PMID:18480403 PMID:20360007
• Sua atividade é estritamente regulada pela ligação de ciclinas e por fosforilações reversíveis. Durante a fase G2, as fosfatases CDC25 removem as fosforilações inibitórias para ativar a CDK1, enquanto as quinases WEE1/PKMYT1 a inibem. Uma vez que os cromossomos se alinham na metáfase, a inativação da CDK1 por WEE1/PKMYT1 permite a saída da mitose e a citocinese. Referências relacionadas: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• A CDK1 localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o núcleo, citoplasma, mitocôndrias e estruturas mitóticas como centrossomos e o fuso, refletindo seus diversos papéis na divisão celular.
• Ela fosforila as laminas (LMNA, LMNB1, LMNB2) na entrada da mitose, desencadeando a desmontagem da lâmina nuclear e a quebra do envelope nuclear. Referências relacionadas: PMID:2188730 PMID:2344612 PMID:37788673
• Além da mitose, a CDK1 regula a apoptose, os ritmos circadianos e o silenciamento gênico através da fosforilação de alvos como FOXO1, NR1D1 e EZH2. Ela também atua como receptor para a entrada do vírus da hepatite C (HCV) em hepatócitos.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que modulam sua atividade e estabilidade. A CDK1 também é um ator chave nos pontos de verificação de dano ao DNA, onde a fosforilação mediada por PKR/EIF2AK2 e WEE1 interrompe o ciclo celular para permitir o reparo.
• A expressão tecidual é ampla, com níveis elevados em células proliferantes e uma notável associação com tecidos de câncer de mama.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 198-297 da CDK1 humana, uma região que contém sítios-chave de fosforilação regulatória. Certifique-se de que o epítopo não esteja mascarado por modificações pós-traducionais em sua amostra.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 34 kDa. Como a CDK1 é regulada pelo ciclo celular, considere sincronizar células ou enriquecer populações mitóticas para melhorar o sinal.
• Ao usar para imuno-histoquímica (IHC-P), otimize a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo. A inclusão de controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, amostras não tratadas vs. amostras com ciclo celular paralisado) é recomendada.
• Valide a reatividade cruzada em seus tecidos/linhagens específicos de camundongo ou rato, pois a homologia de sequência pode afetar a detecção.
• Este anticorpo foi testado em WB, IHC-P, IF/ICC, IP e ELISA; considere realizar experimentos piloto para confirmar a adequação para seu ensaio específico e espécie alvo.

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