Anti-CDK12 Rabbit pAb para WB, IHC-P, ELISA - Q9NYV4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDK12

• O CDK12 é uma quinase dependente de ciclina que atua como um regulador chave do alongamento da transcrição ao fosforilar o domínio C-terminal (CTD) da subunidade grande da RNA polimerase II (POLR2A).
• Fosforila preferencialmente a serina-5 das repetições do CTD que já estão fosforiladas na serina-7, e também pode fosforilar a serina-2, modulando a processividade da RNA polimerase II.
• O CDK12 é necessário para a expressão de genes envolvidos no reparo do DNA, desempenhando, assim, um papel crítico na manutenção da estabilidade genômica.
• A quinase também participa do splicing de RNA, possivelmente através da fosforilação do fator de splicing SRSF1/SF2, ligando o alongamento da transcrição ao splicing co-transcricional.
• O CDK12 está envolvido na regulação da sinalização da quinase MAP, o que pode influenciar a resposta celular aos inibidores de estrogênio.
• A nível subcelular, o CDK12 localiza-se predominantemente no núcleo, particularmente em speckles nucleares, que são locais de transcrição ativa e splicing.
• A proteína é amplamente expressa em vários tecidos, refletindo o seu papel geral na regulação transcricional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1-300), o que pode permitir a detecção de múltiplas isoformas do CDK12 se o N-terminal for conservado; verifique a especificidade no seu sistema experimental.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 164 kDa; use uma porcentagem de gel adequada (por exemplo, 6-8%) e tempos de transferência estendidos para proteínas de alto peso molecular.
• Como um anticorpo policlonal, oferece uma detecção de sinal robusta, mas pode apresentar variabilidade de lote para lote; inclua controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisados com knockdown ou knockout de CDK12).
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), espere coloração nuclear; otimize as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato, pH 6,0) e a diluição do anticorpo para as suas amostras de tecido.
• A reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato; valide o desempenho se usar outras espécies.
• O anticorpo é adequado para ELISA; considere o uso da proteína recombinante CDK12 como padrão para determinar o título e a especificidade do anticorpo.

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