Anticorpo Policlonal Anti-CDK4 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P11802

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CDK4

• A CDK4 (quinase 4 dependente de ciclina), também conhecida como proteína quinase 4 da divisão celular ou PSK-J3, é uma serina/treonina-proteína quinase codificada pelo gene CDK4. É um componente essencial dos complexos ciclina D-CDK4, que regulam a progressão do ciclo celular.
• Como parte do complexo ciclina D-CDK4, a CDK4 fosforila e inibe membros da família de proteínas do retinoblastoma (RB), incluindo a RB1, durante a transição G1/S. Essa fosforilação leva à dissociação do fator de transcrição E2F dos complexos RB/E2F, permitindo a transcrição dos genes-alvo de E2F necessários para a progressão pela fase G1.
• A CDK4 hipofosforila a RB1 no início da fase G1 e atua como um importante integrador de vários sinais mitogênicos e antimitogênicos por meio de sua atividade no complexo ciclina D-CDK4.
• A CDK4 também fosforila a SMAD3 de maneira dependente do ciclo celular, reprimindo sua atividade transcricional e destacando seu papel além da regulação da RB.
• A CDK4 forma um complexo ternário com a ciclina D e a CDKN1B (p27), necessário para a translocação nuclear e a atividade do complexo ciclina D-CDK4.
• A localização subcelular inclui o citoplasma, o núcleo e a membrana nuclear, refletindo seu papel dinâmico na regulação do ciclo celular.
• As palavras-chave do UniProt indicam envolvimento em acetilação, splicing alternativo, ligação ao ATP, ciclo celular, divisão celular e variantes associadas a doenças; trata-se de uma fosfoproteína relacionada a vias associadas ao câncer.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 200-303 da CDK4 humana, uma região próxima à extremidade C-terminal. Esse epítopo pode influenciar o reconhecimento em determinadas aplicações; considere validá-lo no contexto experimental específico.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em torno de 34 kDa. Valide em lisados celulares humanos e de camundongo que expressem CDK4, pois foi relatada reatividade cruzada para ambas as espécies.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), explore padrões de marcação citoplasmáticos e nucleares, consistentes com a localização subcelular da CDK4. Inclua etapas apropriadas de fixação e permeabilização.
• A imunoprecipitação (IP) com este anticorpo policlonal pode enriquecer os complexos de CDK4; considere verificar a coprecipitação da ciclina D ou da CDKN1B caso esteja estudando o complexo ternário.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada em ensaios quantitativos, como ELISA. Realize experimentos de titulação para determinar as diluições de trabalho ideais.

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