Anticorpo policlonal de coelho anti-CDK5 (validado para KO) para WB, ELISA - Q00535

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CDK5

• O CDK5 é uma serina/treonina-quinase direcionada à prolina, essencial para a saída do ciclo celular, diferenciação e sobrevivência das células neuronais. É ativado por p35/CDK5R1 e p39/CDK5R2, predominantemente em neurônios pós-mitóticos.
• Fosforila uma ampla variedade de substratos, incluindo proteínas do citoesqueleto (MAPT/TAU, MAP1B, MAP2), fatores de transcrição (MEF2A, p53/TP53) e reguladores do tráfego de vesículas (SYN1, DNM1, AMPH), modulando assim o crescimento de neuritos, a plasticidade sináptica e a neurotransmissão.
• O CDK5 desempenha funções duplas na morte celular: promove a sobrevivência por meio da ativação de BCL2 e STAT3, mas, em condições de estresse (genotóxico e oxidativo), pode induzir apoptose por meio da fosforilação e estabilização de p53/TP53, enquanto a ativação aberrante por p25 leva à morte neuronal.
• A localização subcelular inclui o citoplasma, o núcleo, a membrana celular e projeções neuronais, como cones de crescimento e densidades pós-sinápticas, refletindo suas diversas funções na transdução de sinais e na dinâmica do citoesqueleto.
• As palavras-chave associadas ao CDK5 incluem ligação ao ATP, quinase, transferase, fosfoproteína, neurodegeneração, neurogênese e ritmos biológicos, destacando seu envolvimento em processos celulares e neurológicos fundamentais.
• Especificidade tecidual: expresso ubiquamente, com acúmulo em neurônios corticais (PubMed:17009320, PubMed:19693690). Também é expresso nos testículos, músculo esquelético, cólon, medula óssea e ovário. Referências relacionadas: PMID:17009320 PMID:19693690
• Modificações pós-traducionais: a acetilação e a fosforilação regulam sua atividade e distribuição subcelular, contribuindo para seu controle rigoroso na fisiologia normal e em doenças.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno, correspondente ao domínio quinase (aa 170-289) do CDK5 humano, é conservado em humanos, camundongos e ratos, sustentando a reatividade cruzada relatada; considere sequenciar a região-alvo em outras espécies para ampliar a aplicação.
• Para Western blot, espera-se uma banda principal em aproximadamente 33 kDa, mas observe que modificações pós-traducionais ou variantes de splicing podem produzir bandas adicionais; inclua um controle positivo (por exemplo, lisado cerebral) e otimize as condições de bloqueio.
• Ao utilizar em ELISA, considere revestir diretamente com o antígeno ou utilizar um par de anticorpos de captura; valide a linearidade e a sensibilidade na matriz da amostra-alvo.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser monitorada; inclua um padrão de referência em cada ensaio.
• Para estudos de localização subcelular, observe a presença do CDK5 nos compartimentos citoplasmático, nuclear e de membrana; o fracionamento celular ou a co-coloração com marcadores de organelas pode auxiliar na interpretação dos resultados.

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