Anticorpo policlonal de coelho Anti-CDK5R1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q15078

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDK5R1

• CDK5R1 (ativador 1 da quinase 5 dependente de ciclina) codifica a subunidade regulatória p35 e sua forma truncada p25, ambas atuando como ativadores neuronais específicos da quinase 5 dependente de ciclina (CDK5).
• O complexo p35/CDK5 é essencial para o desenvolvimento neuronal adequado, incluindo o crescimento de neuritos e a laminação cortical, e medeia a sinalização EFNA1-EPHA4 para regular a morfogênese da espinha dendrítica.
• CDK5R1 participa da regulação do ritmo circadiano ao interagir com CLOCK; o complexo p35/CDK5 fosforila CLOCK nos resíduos Thr-451 e Thr-461, modulando a atividade transcricional do heterodímero CLOCK-BMAL1 e afetando sua estabilidade e distribuição subcelular.
• A proteína se localiza em vários compartimentos subcelulares: membrana celular, projeções neuronais, citoplasma (região perinuclear) e núcleo, refletindo seus diversos papéis na sinalização e regulação.
• A expressão de CDK5R1 é altamente específica para o cérebro e tecidos neuronais.
• As principais modificações pós-traducionais incluem miristoilação (lipoproteína), fosforilação e ubiquitinação (conjugação Ubl); uma estrutura tridimensional já foi determinada.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o CDK5R1 (p35) tem peso molecular previsto de ~34 kDa; também pode ser detectado um produto de clivagem p25 gerado pela calpaína (~25 kDa). Use marcadores de peso molecular apropriados e considere validar a identidade da banda com controles de knockdown ou knockout.
• Na imunofluorescência, otimize a permeabilização e fixação celular para detecção em células neuronais, pois o CDK5R1 se localiza em membranas, neuritos e regiões perinucleares. A co-coloração com marcadores de compartimentos pode auxiliar nos estudos de localização.
• Como anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada; titule o anticorpo para cada novo lote na sua configuração experimental específica.
• Para ELISA, avalie o anticorpo como reagente de captura ou detecção com padrões adequados; a reatividade cruzada com homólogos de CDK5R1 de camundongo e rato sugere utilidade para ensaios multiespécies, mas valide na matriz de amostra de seu interesse.

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