Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CDK8 para WB e ELISA - P49336

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDK8

• O CDK8 é uma quinase dependente de ciclina e um componente central do complexo Mediador, um coativador essencial para a transcrição regulada de quase todos os genes dependentes da RNA polimerase II.
• Ele atua como uma ponte entre proteínas reguladoras específicas de genes e a maquinaria de transcrição basal, servindo de andaime para a montagem do complexo de pré-iniciação com a RNA polimerase II e fatores gerais de transcrição.
• O CDK8 fosforila o domínio C-terminal (CTD) da RNA polimerase II, o que pode inibir a formação do complexo de iniciação da transcrição, atuando como um repressor transcricional. Referências relacionadas: PMID:10993082
• Fosforila a CCNH, levando à regulação negativa do complexo TFIIH e à repressão transcricional. Referências relacionadas: PMID:10993082
• Através da interação com MAML1, o CDK8 hiperfosforila o domínio intracelular do NOTCH, promovendo sua degradação. Referências relacionadas: PMID:15546612
• O CDK8 modula seletivamente a resposta ao interferon, fosforilando o domínio de transativação do STAT1.
• Localizado predominantemente no núcleo, o CDK8 é uma proteína quinase serina/treonina com papéis de ativador e repressor, e variantes genéticas estão ligadas ao transtorno do espectro autista e à deficiência intelectual.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 364–464 do CDK8 humano, uma região que pode conferir especificidade; considere verificar a exclusividade do epítopo no seu sistema alvo.
• Para Western blot, otimize a diluição do anticorpo usando lisados conhecidos como positivos para CDK8 (por exemplo, células HeLa ou HEK293) e confirme a banda esperada de ~53 kDa; controles de carregamento apropriados devem ser incluídos.
• Para ELISA, revestir com proteína CDK8 recombinante ou lisados celulares e validar a linearidade do sinal em uma faixa de concentração; a reatividade cruzada com o CDK8 de camundango suporta ensaios de espécies duplas.
• Como este é um anticorpo monoclonal de coelho recombinante, espera-se alta reprodutibilidade entre lotes; no entanto, revalide o desempenho ao aplicar para novas condições experimentais.
• Note que o CDK8 está envolvido em eventos dinâmicos de fosforilação; considere coquetéis de inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra para preservar os estados de sinalização fosfo.

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