Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CDKN1A para WB, ELISA - P39689

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CDKN1A

• CDKN1A (p21) é um inibidor de quinase dependente de ciclina da família Cip/Kip, originalmente identificado como uma proteína interagente de CDK, proteína associada à diferenciação de melanoma e um fator induzível por p53.
• Ela media a parada do ciclo celular em G1/S e G2 ao se ligar e inibir quinases dependentes de ciclina (CDK2, CDK4/6), bloqueando assim a fosforilação de RB1 e a transcrição gênica dependente de E2F1 (PubMed:36689330). Em níveis estequiométricos, p21 facilita a montagem e importação nuclear do complexo ciclina D-CDK4, enquanto em concentrações mais altas inibe a atividade quinase da CDK4 (PubMed:25329316). Referências relacionadas: PMID:36689330 PMID:25329316
• Desempenha um papel central na parada G2 induzida por dano ao DNA através de mecanismos tanto dependentes quanto independentes de p53/TP53, incluindo a parada mediada por CREB3L1 em astrócitos e osteoblastos (PubMed:37178686). Referências relacionadas: PMID:37178686
• CDKN1A liga-se competitivamente ao PCNA, deslocando POLD3 e, assim, inibindo a síntese de DNA pela DNA polimerase delta.
• Ela se localiza tanto no núcleo quanto no citoplasma, consistente com seus papéis na regulação do ciclo celular e na sinalização citoplasmática.
• A expressão foi confirmada no nível de proteína em queratinócitos.
• Palavras-chave associadas a esta proteína incluem acetilação, fosforilação, conjugação de ubiquitina, domínios de dedo de zinco e ligação a metais, refletindo uma regulação pós-traducional complexa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para gerar este anticorpo policlonal de coelho é o CDKN1A de camundongo recombinante de comprimento total (aa 1-159), que deve reconhecer múltiplos epítopos e tanto as formas não modificadas quanto as modificadas pós-traducionalmente da p21 endógena em amostras de camundongo e rato.
• Para análise de Western blot, uma banda de 18 kDa é prevista; no entanto, devido a modificações pós-traducionais (ex.: fosforilação, ubiquitinação), espécies de peso molecular mais alto ou deslocamentos podem ser observados.
• O anticorpo é fornecido para aplicações de WB e ELISA. Em ELISA sanduíche, considere emparelhar este policlonal como um anticorpo de detecção com um anticorpo de captura validado.
• A expressão de p21 é tipicamente baixa em células em ciclo, mas fortemente regulada positivamente após dano ao DNA. Considere tratar as amostras com agentes danificadores de DNA (ex.: etoposídeo, doxorrubicina) ou privação sérica para induzir p21 antes do teste.

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