Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CDKN1A/p21CIP1 para WB, IHC-P, ELISA - P38936

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDKN1A/p21CIP1

• O inibidor 1 de quinase dependente de ciclina, designado CDKN1A, também é conhecido como p21, CIP1, WAF1, SDI1, CAP20, CDKN1 e MDA-6. Funciona como um potente regulador do ciclo celular.
• O CDKN1A desempenha um papel crítico na parada do ciclo celular mediada por p53/TP53 em resposta a danos no DNA, bloqueando a progressão G1/S e permitindo o reparo do DNA (PubMed:9106657). Referências relacionadas: PMID:9106657
• A proteína se liga e inibe complexos de quinase dependente de ciclina (CDK), impedindo a fosforilação de substratos-chave como o RB1, interrompendo assim a progressão do ciclo celular.
• Em razões estequiométricas baixas, o CDKN1A promove a localização nuclear e a montagem do complexo ciclina D-CDK4, aumentando sua atividade quinase em relação ao RB1, enquanto em razões mais altas inibe o complexo.
• O CDKN1A compete com o POLD3 pela ligação ao antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), resultando na inibição da síntese de DNA pela DNA polimerase delta (PubMed:11595739). Referências relacionadas: PMID:11595739
• A proteína localiza-se principalmente no núcleo, mas também é encontrada no citoplasma. Sua localização nuclear é essencial para a inibição da CDK, e sua atividade é modulada por modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação.
• O CDKN1A é expresso de forma ubíqua em tecidos adultos, com níveis aproximadamente cinco vezes mais baixos no cérebro em comparação com outros tecidos.
• Além de seu papel canônico, o CDKN1A participa da parada G2 induzida por danos no DNA independente de p53 via via CREB3L1 em astrócitos e osteoblastos (Por similaridade).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os 164 aminoácidos N-terminais do CDKN1A/p21CIP1 humano, cobrindo a proteína de comprimento total; confirme que o anticorpo detecta a p21 endógena em aproximadamente 18 kDa por Western blot.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), tanto a marcação nuclear quanto a citoplasmática podem ser observadas. Otimize a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo usando tecidos de controle positivo conhecidos, como carcinoma de cólon ou células em proliferação.
• Em aplicações de ELISA, use proteína p21 recombinante ou lisados celulares de amostras ativadas por p53 para estabelecer curvas padrão e validar a especificidade.
• Como a expressão de p21 é rigidamente regulada por p53 e estresse celular, considere tratar as células com agentes danificadores de DNA (por exemplo, doxorrubicina) para induzir p21 antes da detecção.

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