Anticorpo policlonal de coelho Anti-CDKN1A/p21CIP1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38936

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDKN1A/p21CIP1

• CDKN1A/p21CIP1 é um inibidor de quinase dependente de ciclina que desempenha um papel crítico no controle da progressão do ciclo celular e da parada G2 induzida por danos no DNA (PubMed:9106657). Referências relacionadas: PMID:9106657
• A proteína atua como mediador chave da inibição da proliferação celular dependente de p53/TP53 em resposta a danos no DNA, e também participa de vias de parada G2 independentes de p53 em certos tipos celulares.
• p21 se liga e inibe a atividade de quinases dependentes de ciclina, impedindo a fosforilação de substratos críticos como RB1 para bloquear a progressão do ciclo celular; também facilita a localização nuclear e a montagem do complexo ciclina D-CDK4, com seu efeito sobre a atividade da quinase dependente da estequiometria.
• Inibe a síntese de DNA ao se ligar a PCNA (antígeno nuclear de célula proliferativa) e competir com POLD3 pela ligação a PCNA, bloqueando assim a processividade da DNA polimerase delta (PubMed:11595739). Referências relacionadas: PMID:11595739
• CDKN1A se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, permitindo que ele regule a maquinaria do ciclo celular e outros processos em múltiplos compartimentos subcelulares.
• É expresso de forma ubíqua em todos os tecidos adultos, com níveis notavelmente mais baixos no cérebro.
• A proteína possui um domínio de dedo de zinco e está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, que modulam sua estabilidade e interações.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1-164 do p21 humano; esta região inclui o domínio N-terminal envolvido na ligação a CDK e ciclina, podendo gerar anticorpos que reconhecem a proteína nativa e desnaturada.
• Para análise de Western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 18 kDa correspondente ao p21; no entanto, devido a modificações pós-traducionais, podem ser observados ligeiros desvios de mobilidade.
• Ao realizar imunohistoquímica (IHC-P) ou imunofluorescência (IF/ICC), pode ser necessária a otimização da preparação da amostra e da recuperação de antígeno para obter uma coloração robusta.
• A reatividade cruzada do anticorpo com p21 de camundongo e rato foi observada, mas é recomendável verificar a especificidade no tecido ou linha celular alvo de seu interesse.
• Para aplicações em ELISA, são recomendadas titulações preliminares em xadrez para determinar a concentração ótima do anticorpo de revestimento e detecção.

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